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蛋白 A、蛋白 G、蛋白 A/G 和蛋白 L 是与哺乳动物免疫球蛋白分子结合的微生物来源的天然和重组蛋白。这些蛋白以纯化、无盐、冻干形式获得,也可包被在微孔板并共价固定在各种固体支持物上。最常用的抗体柱亲和纯化支持物是交联微珠状琼脂糖。磁珠是免疫沉淀应用中最常用的支持材料。
天然蛋白 A | 重组蛋白 A | 重组蛋白 G | 重组蛋白 A/G | 重组蛋白 L | |
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天然来源 | 金黄色葡萄球菌 | 金黄色葡萄球菌 | 链球菌 | 不适用 | 大消化链球菌 |
生产来源 | 金黄色葡萄球菌 | 大肠杆菌 | 大肠杆菌 | 大肠杆菌 | 大肠杆菌 |
分子量 | 46,700 | 44,600 | 21,600 | 50,460 | 35,800 |
使用 SDS-PAGE 测量表观质量 | 42 kDa | 45 kDa | 32 kDa | 40-45 kDa | 36 kDa |
Ig 结合位点数量 | 5 | 5 | 2 | 4+2 | 4 |
白蛋白结合位点 | 否 | 否 | 否 | 否 | 否 |
最佳结合 pH | 8.2 | 8.2 | 5 | 5 - 8.2 | 7.5 |
Ig 结合靶点 | Fc | Fc | Fc | Fc | VL-κ |
这四种蛋白(蛋白 A、蛋白 G、蛋白 A/G 和蛋白 L)几乎仅与 IgG 类抗体结合,但其结合特性因 IgG 的种属和亚类而有所不同。蛋白 A 通常是兔、猪、犬和猫 IgG 的首选。蛋白 G 对更多种类的小鼠和人 IgG 亚类(IgG1、IgG2 等)具有更好的结合能力。
蛋白 A/G 是一种重组融合蛋白,包括蛋白 A 和蛋白 G 的 IgG 结合结构域。因此,对于结合来自兔、小鼠、人和其他哺乳动物样品的广泛 IgG 亚类而言,蛋白 A/G 均为理想选择。
蛋白 L 与某些免疫球蛋白 κ 轻链结合。由于 κ 轻链存在于所有类别免疫球蛋白(即 IgG、IgM、IgA、IgE 和 IgD)的成员中,因此蛋白 L 可以纯化这些不同类别的抗体。然而,只有每类中具有适当 κ 轻链的抗体才会结合。通常,需要经验性测试来确定蛋白 L 对于纯化特定抗体是否有效。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。