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泛素是一种高度保守的蛋白,分子量约为 8.5 kDa。它在 26S 蛋白酶体进行蛋白水解降解的过程中起着 ATP 依赖性蛋白质靶向作用。蛋白水解降解对于蛋白维持适当水平的短寿命和调节蛋白至关重要。这些蛋白包括参与细胞代谢、热休克和应激反应、抗原呈递、细胞表面受体和离子通道的调节、细胞周期调节、转录以及信号转导因子的蛋白。
泛素-蛋白酶体通路能够分解了大多数真核细胞胞质和核内的蛋白质。为了执行这一功能,待降解的蛋白质首先通过共价键连接到泛素的 C 端,然后泛素化的复合物会被降解酶识别。
有趣的是,泛素也会与许多类型的病理包涵体共价结合,而这些包涵体似乎对正常的降解过程具有抵抗力。因此,泛素化抗体在研究这些包涵体方面非常有用。例如,阿尔茨海默病诊断中的神经纤维缠结和成对螺旋丝、帕金森病中见到的路易小体,以及皮克病中发现的皮克小体,均存在高度泛素化,并且可以用泛素化抗体轻松实现可视化。Invitrogen 泛素化抗体经验证可用于各种应用。如需查看所有泛素化抗体产品,请单击以下链接。
优质 Invitrogen 泛素化抗体可满足各种研究需求。
泛素 B 的免疫荧光分析。使用 70% 汇合度的对数生长期 SH-SY5Y 细胞进行染色。将细胞用 4% 多聚甲醛固定 10 分钟,用 0.1% Triton TM X-100 透化 10 分钟,并在室温下用 1% BSA 封闭 1 小时。细胞用泛素 (2A1) 用小鼠单克隆抗体,稀释比为 1:250,在 0.1% BSA 中在室温下孵育 3 小时进行标记,然后,用山羊抗小鼠 IgG (H+L) 超级克隆二抗,Alexa Fluor 488 偶联物(货号:A28175),稀释比为 1:2000,在室温下孵育 45 分钟进行标记(panel a:绿色)。细胞核(panel b:蓝色)采用 SlowFade Gold Antifade Mountant DAPI(货号 S36938)染色。F 肌动蛋白(panel c:红色)采用罗丹明鬼笔环肽(货号 R415,1:300)进行染色。panel d 代表合并图像,表示细胞质和细胞核的共定位情况。panel e 显示无一抗对照。这些图像是在放大 60 倍的情况下采集的。
使用泛素多克隆抗体(货号 PA5-17067)对石蜡包埋的人类肺癌组织进行免疫组化分析。