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在难以转染细胞中达到70%以上的转染效率,每次反应仅需几美分。
Lipofectamine 3000试剂采用我们最先进的脂质纳米颗粒技术,实现绝佳转染性能和可重复性的结果。其可针对最广泛类型的常见及难转染细胞,实现超高转染效率(图1),同时提供更高的细胞活力。
图1.Lipofectamine 3000试剂性能优于Invitrogen Lipofectamine 2000和FuGENE HD试剂。使用上述试剂分别在96孔板内转染HEK 293、HeLa、LNCaP、HepG2和A549细胞,并在转染48小时后分析GFP表达。在所有5种细胞系内, Lipofectamine 3000试剂GFP转染效率均高于 Lipofectamine 2000和FuGENE HD试剂。
图2.Lipofectamine 3000的转染步骤简单易用,同时仍确保了在多种细胞类型中的最佳性能和可靠性。
研发Lipofectamine 3000时,我们优化了转染过程的全部四个步骤,并结合了我们最先进的脂质纳米颗粒技术。绝佳的转染性能可以降低所需的试剂量,并降低所有可能对您的细胞系产生毒性的风险。
图3.使用3种不同试剂以图中所示的用量在96孔板内向Hela细胞中转染绿色荧光蛋白(GFP)–表达载体。转染后48小时使用流式分析测定转染效率和GFP表达强度。Lipofectamine 3000试剂相比Lipofectamine 2000试剂和Lipofectamine LTX试剂获得了更高的转染效率和蛋白表达。
使用与癌症最相关的细胞系得到与您研究的问题最相关的答案。凭借更广的适用细胞类型、更高的转染效率,Lipofectamine 3000试剂让您能够灵活选择研究所用的细胞系。
细胞类型 | Lipofectamine 3000试剂转染效率 | Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数 | 细胞类型来源 |
---|---|---|---|
NIH/3T3 | ![]() | 4 | 小鼠胚胎成纤维细胞系 |
4T1 | ![]() | 2 | 小鼠乳腺肿瘤细胞系 |
A431 | ![]() | 2 | 人表皮样癌细胞系 |
A549 | ![]() | 3 | 人肺癌细胞株 |
ACHN | ![]() | 2 | 人肾癌细胞系 |
bEnd.3 | ![]() | 9 | 小鼠脑内皮细胞系 |
BJ | ![]() | 3 | 人皮肤成纤维细胞系 |
BT-549 | ![]() | 4 | 人乳腺肿瘤细胞系 |
C2C12 | ![]() | 3 | 小鼠成肌细胞系 |
C6 | ![]() | 5 | 大鼠神经胶质瘤细胞系 |
Caco-2 | ![]() | 2 | 人结肠癌细胞系 |
Caki-1 | ![]() | 4 | 人肾透明细胞癌细胞系 |
CHO-K1 | ![]() | 1 | 中国仓鼠卵巢细胞系 |
CHO-S | ![]() | 1 | 中国仓鼠卵巢细胞系 |
COLO 205 | ![]() | 4 | 人结肠癌细胞株 |
COS-7 | ![]() | 4 | 猴成纤维细胞样细胞系 |
转染效率(%)*<30% 30~50%
51~79%
>80%
细胞类型 | Lipofectamine 3000试剂转染效率 | Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数 | 细胞类型来源 |
---|---|---|---|
DU 145 | ![]() | 2 | 人前列腺癌细胞系 |
H460 | ![]() | 3 | 人肺癌细胞系 |
H9c2 | ![]() | 3 | 大鼠心肌细胞系 |
HCC1937 | ![]() | 5 | 人乳腺癌细胞系 |
HCT 116 | ![]() | 1 | 人结肠癌细胞系 |
HEK-293 | ![]() | 2 | 人胚肾细胞系 |
HeLa | ![]() | 3 | 人宫颈癌细胞系 |
Hep 3B | ![]() | 2 | 人肝癌细胞系 |
Hepa 1-6 | ![]() | 1 | 小鼠肝癌细胞系 |
Hep G2 | ![]() | 9 | 人肝癌细胞系 |
Hs 578T | ![]() | 3 | 人乳腺癌细胞系 |
HT-1080 | ![]() | 1 | 人纤维肉瘤细胞系 |
HT-29 | ![]() | 1 | 人结肠癌细胞系 |
Huh-7 | ![]() | 4 | 人肝癌细胞系 |
Jurkat | ![]() | 1 | 人T淋巴细胞细胞系 |
转染效率(%):<30% 30~50%
51~79%
>80%
细胞类型来源 | Lipofectamine 3000试剂转染效率 | Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数 | 细胞类型来源 |
---|---|---|---|
K- 562 | ![]() | 1 | 人白血病细胞系 |
L6 | ![]() | 8 | 大鼠骨骼肌细胞系 |
L929 | ![]() | 2 | 小鼠纤维肉瘤细胞系 |
LNCaP | ![]() | 6 | 人前列腺癌细胞系 |
MCF 10A | ![]() | 5 | 人乳腺上皮细胞系 |
MCF7 | ![]() | 2 | 人乳腺肿瘤细胞系 |
MDA-MB-231 | ![]() | 3 | 人乳腺癌细胞系 |
MDA-MB-453 | ![]() | 1 | 人乳腺肿瘤细胞系 |
MDA-MB-468 | ![]() | 9 | 人乳腺癌细胞系 |
MDCK | ![]() | 1 | 犬肾细胞系 |
神经-2a | ![]() | 1 | 小鼠神经母细胞瘤细胞系 |
NCI-H23 | ![]() | 2 | 人肺腺癌细胞系 |
NCI-H460 | ![]() | 17 | 人肺癌细胞系 |
P19 | ![]() | 1 | 小鼠胚胎癌细胞系 |
PANC-1 | ![]() | 3 | 人上皮癌细胞系 |
PC-12 | ![]() | 2 | 大鼠嗜铬细胞瘤细胞系 |
转染效率(%)*<30% 30~50%
51~79%
>80%
细胞类型来源 | Lipofectamine 3000试剂转染效率 | Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数 | 细胞类型来源 |
---|---|---|---|
RAW 264.7 | ![]() | 4 | 小鼠巨噬细胞细胞系 |
RBL | ![]() | 2 | 大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞 |
RD | ![]() | 4 | 人横纹肌肉瘤细胞系 |
Saos-2 | ![]() | 4 | 人骨肉瘤细胞株 |
SH-SY5Y | ![]() | 1 | 人神经母细胞瘤细胞系 |
SK-BR-3 | ![]() | 4 | 人乳腺癌细胞系 |
SK-MEL-28 | ![]() | 2 | 人黑色素瘤细胞系 |
SK-N-SH | ![]() | 6 | 人神经母细胞瘤细胞系 |
SK-OV-3 | ![]() | 3 | 人卵巢癌细胞系 |
SW480 | ![]() | 2 | 人结肠癌细胞系 |
SW620 | ![]() | 5 | 人结肠癌细胞系 |
T98G | ![]() | 4 | 人胶质母细胞瘤细胞系 |
U2OS | ![]() | 3 | 人骨肉瘤细胞株 |
U-937 | ![]() | 2 | 人体组织细胞性白血病细胞系 |
Vero | ![]() | 1 | 猴肾细胞系 |
转染效率(%)*<30% 30~50%
51~79%
>80%
细胞类型 | Lipofectamine 3000试剂转染效率 | Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数 | 细胞类型来源 |
---|---|---|---|
NIH/3T3 | ![]() | 4 | 小鼠胚胎成纤维细胞系 |
4T1 | ![]() | 2 | 小鼠乳腺肿瘤细胞系 |
A431 | ![]() | 2 | 人表皮样癌细胞系 |
A549 | ![]() | 3 | 人肺癌细胞株 |
ACHN | ![]() | 2 | 人肾癌细胞系 |
bEnd.3 | ![]() | 9 | 小鼠脑内皮细胞系 |
BJ | ![]() | 3 | 人皮肤成纤维细胞系 |
BT-549 | ![]() | 4 | 人乳腺肿瘤细胞系 |
C2C12 | ![]() | 3 | 小鼠成肌细胞系 |
C6 | ![]() | 5 | 大鼠神经胶质瘤细胞系 |
Caco-2 | ![]() | 2 | 人结肠癌细胞系 |
Caki-1 | ![]() | 4 | 人肾透明细胞癌细胞系 |
CHO-K1 | ![]() | 1 | 中国仓鼠卵巢细胞系 |
CHO-S | ![]() | 1 | 中国仓鼠卵巢细胞系 |
COLO 205 | ![]() | 4 | 人结肠癌细胞株 |
COS-7 | ![]() | 4 | 猴成纤维细胞样细胞系 |
转染效率(%)*<30% 30~50%
51~79%
>80%
细胞类型 | Lipofectamine 3000试剂转染效率 | Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数 | 细胞类型来源 |
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DU 145 | ![]() | 2 | 人前列腺癌细胞系 |
H460 | ![]() | 3 | 人肺癌细胞系 |
H9c2 | ![]() | 3 | 大鼠心肌细胞系 |
HCC1937 | ![]() | 5 | 人乳腺癌细胞系 |
HCT 116 | ![]() | 1 | 人结肠癌细胞系 |
HEK-293 | ![]() | 2 | 人胚肾细胞系 |
HeLa | ![]() | 3 | 人宫颈癌细胞系 |
Hep 3B | ![]() | 2 | 人肝癌细胞系 |
Hepa 1-6 | ![]() | 1 | 小鼠肝癌细胞系 |
Hep G2 | ![]() | 9 | 人肝癌细胞系 |
Hs 578T | ![]() | 3 | 人乳腺癌细胞系 |
HT-1080 | ![]() | 1 | 人纤维肉瘤细胞系 |
HT-29 | ![]() | 1 | 人结肠癌细胞系 |
Huh-7 | ![]() | 4 | 人肝癌细胞系 |
Jurkat | ![]() | 1 | 人T淋巴细胞细胞系 |
转染效率(%):<30% 30~50%
51~79%
>80%
细胞类型来源 | Lipofectamine 3000试剂转染效率 | Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数 | 细胞类型来源 |
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K- 562 | ![]() | 1 | 人白血病细胞系 |
L6 | ![]() | 8 | 大鼠骨骼肌细胞系 |
L929 | ![]() | 2 | 小鼠纤维肉瘤细胞系 |
LNCaP | ![]() | 6 | 人前列腺癌细胞系 |
MCF 10A | ![]() | 5 | 人乳腺上皮细胞系 |
MCF7 | ![]() | 2 | 人乳腺肿瘤细胞系 |
MDA-MB-231 | ![]() | 3 | 人乳腺癌细胞系 |
MDA-MB-453 | ![]() | 1 | 人乳腺肿瘤细胞系 |
MDA-MB-468 | ![]() | 9 | 人乳腺癌细胞系 |
MDCK | ![]() | 1 | 犬肾细胞系 |
神经-2a | ![]() | 1 | 小鼠神经母细胞瘤细胞系 |
NCI-H23 | ![]() | 2 | 人肺腺癌细胞系 |
NCI-H460 | ![]() | 17 | 人肺癌细胞系 |
P19 | ![]() | 1 | 小鼠胚胎癌细胞系 |
PANC-1 | ![]() | 3 | 人上皮癌细胞系 |
PC-12 | ![]() | 2 | 大鼠嗜铬细胞瘤细胞系 |
转染效率(%)*<30% 30~50%
51~79%
>80%
细胞类型来源 | Lipofectamine 3000试剂转染效率 | Lipofectamine 3000 相较 lipofectamine 2000蛋白表达提高倍数 | 细胞类型来源 |
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RAW 264.7 | ![]() | 4 | 小鼠巨噬细胞细胞系 |
RBL | ![]() | 2 | 大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞 |
RD | ![]() | 4 | 人横纹肌肉瘤细胞系 |
Saos-2 | ![]() | 4 | 人骨肉瘤细胞株 |
SH-SY5Y | ![]() | 1 | 人神经母细胞瘤细胞系 |
SK-BR-3 | ![]() | 4 | 人乳腺癌细胞系 |
SK-MEL-28 | ![]() | 2 | 人黑色素瘤细胞系 |
SK-N-SH | ![]() | 6 | 人神经母细胞瘤细胞系 |
SK-OV-3 | ![]() | 3 | 人卵巢癌细胞系 |
SW480 | ![]() | 2 | 人结肠癌细胞系 |
SW620 | ![]() | 5 | 人结肠癌细胞系 |
T98G | ![]() | 4 | 人胶质母细胞瘤细胞系 |
U2OS | ![]() | 3 | 人骨肉瘤细胞株 |
U-937 | ![]() | 2 | 人体组织细胞性白血病细胞系 |
Vero | ![]() | 1 | 猴肾细胞系 |
转染效率(%)*<30% 30~50%
51~79%
>80%
Lipofectamine 3000试剂在一系列不同组织来源的癌症细胞系中比其他领先的转染试剂如Lipofectamine 2000试剂,转染效率更高。使用Lipofectamine 2000试剂时仅有25%的癌症细胞系可以被认为易于转染(转染效率>50%),而使用Lipofectamine 3000试剂时认为易于转染的细胞占60%。
图4.使用Lipofectamine 2000 试剂和Lipofectamine 3000试剂向17个细胞系内转染GFP表达质粒,转染在24孔板内进行,0.5 µg质粒/孔。48小时后分析基因表达。每个条件重复了3次,数据点表示转染效率+SD.
Lipofectamine 3000的高转染效率和Epi5™ Episomal iPSC重编程试剂盒结合可以实现高效体细胞重编程,无需电转染。
图5.Lipofectamine 3000试剂盒电转染的重编程效率比较。使用Lipofectamine 3000 试剂或Neon转染系统将Epi5™载体转染进入BJ成纤维细胞以及新生儿(HDFn)和成人(HDFa)皮肤成纤维细胞并将其重编程为iPSC。采用明场显微镜和碱性磷酸酶(B) 染色法,对克隆进行(A)可视化。
Lipofectamine 3000试剂的研发突破了细胞转染的界限并促进了新技术例如基因组编辑在生物学相关领域的应用。使用这一新试剂,Invitrogen GeneArt TALs 和 CRISPR 在HepG2和U2OS细胞中对基因组AAVS1位点进行靶向编辑,并显示出更高的转染效率、平均荧光强度和基因组剪切效率。这些转染技术上的进步简化了令人头疼的下游工作流程,使得对干细胞的操作更为简单,并提高了转基因在细胞基因组上的位点特异性插入效率。
图6.GeneArt TALs 和CRISPRs剪切效率。TALs 和 CRISPRs 靶向 (A) U2OS 和(B) HepG2 细胞系内的AAVS1 位点。采用Invitrogen GeneArt 基因组剪切检测试剂盒分析剪切效果。
图7.CRISPR载体的转染效率和蛋白表达。含有报告基因开放阅读框(OFP)的载体被Lipofectamine 2000或Lipofectamine 3000 试剂转染进 (A) U2OS 和 (B) HepG2细胞系。柱状图显示报告基因表达,图片显示相应的细胞内OFP荧光蛋白的表达。
图8.转染干细胞。使用Lipofectamine 3000试剂转染 (A) H9 ESCs 或(B) iPSCs。使用荧光显微镜观察细胞并通过流式细胞仪检测转染效率。
包装必须保护内部产品——但这并不意味着必须牺牲可持续性。Lipofectamine产品在常温下运输,每年将24,000立方英尺的膨胀聚苯乙烯(EPS)冷却箱从垃圾填埋场中回收。我们通过减少80吨的碳足迹(CO2当量)来降低包装和运输这些产品的环境影响。