用于 qRT-PCR 的 SuperScript™ III 第一链合成 SuperMix

用于 qRT-PCR 的 SuperScript™ III 第一链合成 SuperMix 提供了针对合成第一链 cDNA 优化的 SuperMix 形式的 SuperScript™ III 反转录酶的高温功能，用于实时定量 RT-PCR (qRT-PCR)。简单、省时的反应体系配制只需两管：2X 反应混合物和酶混合物。

酶混合物
SuperScript™ III 反转录酶（包括在 RT 酶混合物中）是 M-MLV RT 的一种版本，经过工程改造以降低 RNase H 活性并提高热稳定性。该酶可用于在 42–60°C 的温度范围内合成 cDNA，相较于其他反转录酶，可提供更高特异性、更高 cDNA 得率和更多全长产物。由于 SuperScript™ III RT 不会受到核糖体和转运 RNA 显著抑制，因此可用于从总 RNA 合成 cDNA。RNaseOUT™ 重组核糖核酸酶抑制剂（也包括在酶混合物中）是一种 RNase 抑制剂蛋白，可防止靶标 RNA 因 RNA 制备中的核糖核酸酶污染而降解。

反应混合物
2X RT 反应混合物包括针对 qRT-PCR 优化的含寡核苷酸 (dT)₂₀、随机六聚体、MgCl₂ 和 dNTP 的缓冲液制剂。大肠杆菌 RNase H 在试剂盒中以单管形式提供，用于在第一链合成后从 cDNA:RNA 杂交分子中去除 RNA 模板。已证明其可提高 qRT-PCR 的灵敏度。

使用 SuperScript™ III 型第一链合成 SuperMix
该 SuperMix 制剂可用于对 qRT-PCR 中少于10个拷贝数的靶基因进行定量检测，具有较宽的动态范围，支持从高达 1 µg 的总 RNA 中准确定量检测高拷贝 mRNA。提供的试剂可用于50或250次 RT 反应，每次反应 20µL。