T4 DNA 聚合酶

T4 DNA 聚合酶是具有 3´-脱氧核糖核酸内切酶活性，但没有 5´a3´ 脱氧核糖核酸内切酶活性的 DNA 聚合酶。 提供 T4 DNA 聚合酶技术公告。

应用： 通过取代合成标记线性双链 DNA (1)。 寡核苷酸介导的位点特异性突变 (2)。 双链 DNA 的 3´ 末端标记 (3)。 将 5´ 或 3 突出端磨成平末端 (4)。

来源： 纯化自表达质粒所带 T4 DNA 聚合酶的大肠杆菌。

性能和质量测试： 单链和双链脱氧核糖核酸内切酶和磷酸酶分析；脱氧核糖核酸内切酶和聚合酶活性经过测试。

单位定义： 一个单位的酶量可以在 37°C 的反应体系中，以 DNase I 切口 DNA 作为模板•引物，在 30 分钟内向酸沉淀材料中掺入 10 nmol 总脱氧核糖核苷酸。

单位反应条件： 反应物共 0.1 ml，包括 50 mM 甘氨酸-NaOH (pH 8.8)、16.6 mM (NH₄)₂SO₄、6 mM MgCl₂、6.5 μM EDTA、10 mM 2-巯基乙醇、0.165 mg/ml BSA、1.6 mg/ml DNase I 切口鲑鱼睾丸 DNA、0.33 mM dCTP、0.33 mM dATP、0.33 mM dGTP、0.33 mM dTTP、76 nM [³H]dTTP 和酶，温度为 37 °C，时间 30 分钟。