SuperScript™ III CellsDirect™ cDNA 合成试剂盒

SuperScript™ III CellsDirect cDNA 合成试剂盒经过优化，可直接从哺乳动物细胞裂解物中合成第一链 cDNA，而无需先分离 RNA。裂解和反转录在同一根试管中进行，得到的第一链 cDNA 即刻可用于克隆和 PCR。对于实时荧光定量 RT-PCR，请参阅以下注释。该试剂盒具有以下优点：

•与在不同处理条件下生长的各种哺乳动物细胞类型相容
• 单管形式尽可能地减少了试剂损失、样品损失和处理时间
• 在第一链 cDNA 合成反应中使用总裂解物体积，从而用有限细胞数量提供更高得率，并允许检测罕见转录物
• SuperScript™ III 反转录酶具有较低 RNase H 活性和较高热稳定性，在第一链合成反应中产生高得率 cDNA，以便提高灵敏度并增强罕见转录物的检测
• 生成优质 cDNA 以供在各种应用中使用，包括克隆和 PCR
• 简单方案所需时间少于2小时；

工作原理
在传统 RT-PCR 中，首先从细胞中分离出 RNA，这个程序非常耗时，会导致材料损失。使用 SuperScript™ III CellsDirect cDNA 合成系统，可在单管中将细胞裂解，并以尽可能少的操作量从裂解液中获得 cDNA，且无样品损失。添加 DNase I，以便在第一链合成前消除基因组 DNA。该试剂盒已针对范围从 10,000 个细胞一直到单个细胞（通过系列稀释测量）的小细胞样品进行了优化。使用 SuperScript™ III 反转录酶确保从少量起始材料—少至 10 pg 总 RNA 中获得高特异性和高得率的 cDNA。合成后，可通过 PCR 用特异性引物扩增第一链 cDNA，而无需中间有机提取或乙醇沉淀。