POROS CaptureSelect BacuClear 亲和基质专门设计用于在使用杆状病毒表达系统 (BEVS) 生产重组生物分子时去除杆状病毒污染物。在表达病毒和病毒样颗粒 (VLP) 时尤其有用,其大小和包膜结构与杆状病毒相似,使得区分和分离共表达杆状病毒污染物尤其具有挑战性。开发的杆状病毒特异性 CaptureSelect 亲和配体旨在应对此挑战,并偶联至高性能 POROS 基质。POROS 微珠的大孔结构可实现大生物分子的高效纯化。
为了去除杆状病毒杂质,亲和基质以流过模式运行。如 Moleirinho 等人所述(1),使用偶联至 POROS 基质的已鉴别亲和配体 (BV-2),可成功地从流感 VLP、HCV VLP 和 AAV 中去除杆状病毒颗粒。证明了 1.6 × 1010 VG /mL 亲和基质的杆状病毒颗粒动态结合容量,测得杆状病毒去除率高于 70%,VLP 回收率高于 60%。
该亲和基质的特点包括:
•在流过模式下,仅通过一步即可从含病毒和 VLP 的样品中去除杆状病毒病毒颗粒
• 可采用用于去除杆状病毒的高度选择性精制步骤
• 高特异性、容量和保留活性
• 出色的可扩展性
• 非动物源性
无动物组分
CaptureSelect 产品含有基于重组单结构域抗体片段 (VHH)(通过专利技术生成)的亲和配体。VHH 亲和配体是一种包含 3 个可形成抗原结合结构域的互补决定区 (CDR) 的 12 至 15 kDa 片段,通过不含任何动物组分(非动物源性)的生产工艺在酵母菌酿酒酵母中高效生产。
主要特性:
基质:交联聚(苯乙烯-二乙烯基苯)
平均粒径:50 µm
配体:CaptureSelect BacuClear 亲和配体
配体偶联方法:环氧化物
结合容量:估计值 > 1 x 1010 VG/mL 树脂
再生条件:使用 0.5 M 乙酸(pH 值 2)建立酸性剥离条件
机械阻力:100 bar (1,450 psi, 10 MPa)
配方缓冲液:20% (v/v) 乙醇
1.M.G.Moleirinho, R.P.Fernandes, S.B.Carvalho, S. Bezemer, F. Detmers, P Hermans, R.J.S.Silva, P.M. Alves, M.J.T.Carrondo, C. Peixoto.基于病毒的生物工艺中的杆状病毒亲和去除。Sep. Purif.Technol.241 (2020)