Pierce™ 碘化微珠

Thermo Scientific Pierce 碘化珠是包被氧化试剂的 3 mm 直径聚苯乙烯微珠，其可实现碘-125 的高效活化以用于蛋白或肽碘化程序。

碘化微珠的特点：

•衍生化、均一、无孔聚苯乙烯微珠
• 显著可重现的碘化
• 碘-125 掺入高达 99%；标记蛋白回收率 > 90%
• 在较宽的 pH 值和温度范围内发挥作用
• 在存在叠氮化物、去污剂、尿素和高盐的情况下进行碘化
• 可对细胞膜表面蛋白进行高效碘化
• 比可溶性氯胺-T 更温和的碘化方法，因为蛋白与固定的氧化剂之间不接触 (Markwell, 1982)
• 快速且易于使用…在 2-15 分钟内完成碘化
• 仅需用镊子或巴斯德吸管从反应混合物中取出微珠即可停止反应；无需使用还原剂终止反应
• 在孵育时间内提供更多控制
• 碘化高达 500 μg 含酪氨酸的肽或蛋白/微珠
• 可用于在 pH 值 8.22 下对组氨酸进行定量碘化

包被碘化微珠提供便利高效的碘标记，而不存在通常与氯胺 T 和其他基于溶液的方法相关的困扰和氧化损伤效应。每毫升蛋白溶液中可添加一个或两个微珠，然后在标记反应后轻松去除，从而完全去除蛋白中的氧化试剂。

碘化涉及将放射性碘引入蛋白和肽中的某些氨基酸（通常是酪氨酸）中。在酪氨酸上的羟基邻位处进行碘化；可能会发生单或双取代。当在蛋白中不存在可碘化位点（如酪氨酸）或这些位点的可及性受限时，可使用 Bolton-Hunter 试剂（SHPP 和 Sulfo-SHPP）引入可碘化酚类位点。某些交联剂也在其间隔臂中含有可碘化酪氨酰基团。

放射性 125-I 或 131-I 可通过酶促或化学氧化掺入蛋白中。在化学氧化方法中，碘化钠被转化成其相应的反应性碘形式，然后自发地掺入酪氨酰基团中。虽然氧化试剂对于碘活化是必需的试剂，但可能损伤蛋白。碘化微珠（之前称为 IODO-微珠）提供的固相布置可尽可能减少损伤效应。