DAPI（4,’6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐）

Thermo Scientific Pierce DAPI 细胞核复染剂是用于在细胞成像技术中对 DNA 含量和细胞核进行固定细胞荧光染色的高纯度形式的二脒基-2-苯基吲哚染料。

DAPI（二脒基-2-苯基吲哚）是一种蓝色荧光探针，在选择性地结合至双链 DNA 的小沟时发明亮荧光，其中荧光比非结合状态下的荧光高约 20 倍。其对 DNA 的选择性和高细胞可透过性可实现对细胞核的高效染色，而来自细胞质的背景极小。DAPI 是用于免疫荧光显微技术的经典细胞核复染剂，也是需要对 DNA 含量进行细胞定量的高内涵筛选方法的重要组成部分。

DAPI 细胞核复染剂的特点：

•DAPI 染料—二脒基-2-苯基吲哚是一种 DNA 特异性蓝色荧光染色剂
• 便利—可选择粉末或易于使用的 DAPI 染料溶液 (1 mg/mL)
• 细胞成像—细胞渗透性染料可有效对固定细胞进行染色并对 DNA 含量进行定量
• 复染剂—适用于并行检测特异性靶标与荧光显微镜检查或高内涵筛选 (HCS) 荧光抗体

DAPI 荧光染料的特性：

•其他名称：DAPI 染色剂、DAPI 染料、DNA 含量复染剂
•化学名称：4,6'--二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐；4',6-二脒基-2-苯基吲哚；2-(4-脒苯基)-6-吲哚胍二盐酸盐
• 分子式：C₁₆H₁₅N₅·2HCl
• 分子量：350.25
• 激发波长：341±3 nm（与 dsDNA 结合时接近 360 nm）
• 发射波长：452±3 nm（与 dsDNA 结合时为 456 至 460 nm）
• 消光系数：347 nm 处 > 30,600/M cm，溶于甲醇
• CAS 号：28718-90-3
• 纯度：通过 HPLC 法测定，240 nm 处 > 95%（大多数批次 >98%）
• 溶解度：水中 >1 mg/mL；化合物可溶于 DMF、水和各种非磷酸盐水性缓冲液
• 反应性基团：无；与双链 DNA 的小沟结合

作为荧光成像方法的复染剂，DAPI 可兼容荧光素和罗丹明染料标记的抗体及其他探针以及 Thermo Scientific DyLight Fluor。DAPI 的光稳定性高于 Hoechst 染料，但是 Hoechst 33342 可用于活细胞成像，而 DAPI 仅适用于固定细胞。DAPI 以粉末固体和水溶液形式提供。

DAPI 染色剂的应用：

•检测溶液中的 DNA（参考 4）
•诊断细胞培养物的支原体感染（参考 5）
•在流式细胞分析中测量细胞核含量并对染色体进行分类（参考 6）
•评估细胞凋亡（参考 7）
•检测免疫荧光和原位杂交程序中的细胞核和有机物 DNA（参考 2、8）
•更换琼脂糖凝胶中用于 DNA 染色的溴化乙锭（参考 5、9）
•在利用红色荧光抗体检测特异性靶标的组织化学方法中对细胞核进行复染（参考 8）
•；报告还指出 DAPI 可与多聚磷酸盐和其他多聚阴离子（参考 10）、硫酸葡聚糖（参考 11）和 SDS（参考 12）结合。

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