GeneArt™ 定点突变系统可提供较先进、简单、方便且高效的方法,在不到三小时内在体外
靶标构建体上生成突变。该系统取代常用 GeneTailor™ 定点突变系统,并且完全重新设计为处于市场上当前可用的商业定点突变产品的前沿。该产品可将我们的突变技术提升到一个新的水平。备注:PCR 酶不包括在系统中,须单独购买。针对该试剂盒推荐的酶是 AccuPrime™ Pfx DNA 聚合酶。
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有效– 可在长达 14 Kb 的质粒中取代、删除或插入多达 12 个核苷酸
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高效– 首次使用即可获得您的所需突变体;使用 3 Kb 质粒可获得超过 90% 的正确突变体
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快速– 使用简单、较少的处理方案在不到 3 小时内即可获得您的突变质粒 DNA
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通用型– 可使用多种大小的质粒和从任意来源分离的 DNA,无需专用载体、宿主菌株或限制性位点
简单创建所需突变体使用 GeneArt™ 定点突变系统创建突变体依赖于 DNA 甲基化酶、高保真度 DNA 聚合酶、重组酶和
大肠杆菌天然
McrBC 核酸内切酶的固有特性。只需将您需要的一个突变或多个突变(多达 12 个核苷酸)掺入引物中,然后进行 PCR、重组和转化,此后您就能获得仅具有您所需突变的载体,效率高达 90%。您向其中添加突变的模板载体可从任何来源中分离出来,大小高达 14 Kb。要创建完整的构建体或要连接大量不相关 DNA,请参见我们的
GeneArt™ 无缝克隆和组装试剂盒(货号 A13288)或
GeneArt™ 高阶遗传组装系统(货号 A13286)。
优化突变方案GeneArt™ 定点突变系统已在效率和简单性方面进行了优化。DNA 甲基化和扩增步骤整合到单次反应中,无需
体外 DpnI 酶切步骤。甲基化和扩增后,扩增 PCR 产物的 10 分钟
体外重组反应使菌落输出量增加 3 至 10 倍,从而获得更高突变效率。将突变 DNA 最终转化至 DH5α™
大肠杆菌细胞中,可对任何甲基化亲本 DNA 进行酶切,仅留下完整的未甲基化突变反应产物。无需纯化步骤或额外的酶切。可于次日选择单个菌落以验证突变。