TrueTag™ 敲除富集供体 DNA 试剂盒

Invitrogen TrueTag 敲除富集供体 DNA 试剂盒提供了一种快速解决方案，用于驱动转染即用型供体 DNA 进行高效基因敲除和富集（高达 100% 的编辑后细胞），以便进行基因组编辑实验。

TrueTag 敲除富集供体 DNA 试剂盒的优势包括：
• 轻松设计和订购生成敲除细胞系所需的全部组分
• 与单细胞分离和表征相比，可节省长达3个月的富集时间
• 利用选择标记物可获得高达 100% 的编辑后细胞

TrueTag 敲除富集供体 DNA 试剂盒提供了实现功能基因敲除和富集编辑后细胞所需的一切。生成的供体将插入 3X 终止密码子、一个选择标记物和一个荧光标记—只需提供两个位点特异性引物，即可为供体添加同源臂并进行 PCR 扩增。各试剂盒的设计目的在于使您可以进行以下操作：
• 插入 3X 终止密码子以敲除基因功能
• 用不同的荧光基团（GFP 或 RFP）标记每个等位基因，以验证双等位基因敲除
• 利用嘌呤霉素和杀稻瘟菌素选择标记物进行双等位基因敲除确认
• 细胞富集后，使用 Cre/Lox 轻松去除抗生素抗性标记物

试剂盒内容物
• 四个线性供体模板：GFP/嘌呤霉素抗性、GFP/杀稻瘟菌素抗性、RFP/嘌呤霉素抗性、RFP/杀稻瘟菌素抗性
• Phusion 快速高保真 PCR 预混液
• PCR 纯化柱和缓冲液
• 用于敲除人 HPRT1 的阳性对照引物

用于快速设计基因特异性试剂的 TrueDesign Genome Editor 软件
正确敲入荧光标记需要靶标特异性基因编辑试剂。确定您感兴趣的靶基因转录本，基于网络的 TrueDesign Genome Editor 软件会为您完成以下工作：
1.显示您的靶基因转录本
2.指定您的插入位点
3.设计并帮助轻松订购 TrueTag 试剂盒中未包含的所有必要组分：
    • CRISPR 向导 RNA 或 TALEN，设计为靠近 N 端或 C 端
    • 寡核苷酸，用于对供体进行 PCR 扩增并添加适当的同源臂
    • 测序引物，用于评估 CRISPR-Cas9 切割效率
    • 验证引物，用于验证 TrueTag DNA 供体是否正确插入

其他需要使用并可单独购买或作为 TrueDesign 工作流程的一部分提供的组分：
• TrueCut Cas9 蛋白 v2、TrueCut HiFi Cas9 蛋白或 GeneArt CRISPR mRNA
• CRISPRMAX 转染试剂或 MessengerMAX 转染试剂