5' | | | G | A | G | C | T ↓ | C | | 3‘ | |
3‘ | | | C ↑ | T | C | G | A | G | | 5' | |
Thermo Scientific SacI 限制性内切酶可识别 GAGCT^C 位点,于 37°C 下在其独特的缓冲液中的切割效果最佳。有关该酶和其他限制性内切酶的酶活性、双重酶切条件和热灭活的表格,请参见
限制性内切酶的反应条件。备注:另外提供用于快速 DNA 酶切的
FastDigest 酶。同裂酶:Eco53kI、EcoICRI、Psp124BI、SstI。
Thermo Scientific 常规限制性核酸内切酶是高质量限制性内切酶的大量汇集物,经过优化以便在五缓冲液系统的一种缓冲液中发挥作用。此外还提供通用 Tango 缓冲液,便于进行双酶切。所有酶在推荐的缓冲液和反应条件下均表现出 100% 活性。为确保一致的性能,Thermo Scientific 限制性内切酶反应缓冲液包含预混合 BSA,其可增强多种酶的稳定性,并与 DNA 制剂中可能存在的污染物相结合。
特点•卓越的质量—严格的质量控制和行业领先的生产工艺
•便利的颜色编码的五缓冲液系统
•包括用于双酶切的通用型 Tango 缓冲液
•在反应缓冲液中预混合 BSA
•多种限制性核酸内切酶特异性可供选择
应用•分子克隆
•限制位点作图
•基因分型
•Southern 印迹
•限制性片段长度多态性 (RFLP)
•SNP
备注:SacI 在 GAGmCTC 处对胞嘧啶甲基化敏感,但对 GAGCTmC 处的胞嘧啶甲基化不敏感,且对 GmAGCTC 处的腺嘌呤甲基化不敏感。AluI 甲基转移酶 (AGmCT) 可用于阻断 SacI。为实现完全酶切,超螺旋质粒需要的 SacI 可能是线性 DNA 所需量的 5 倍。SacI 受临床上常见抗凝血剂的抑制,这些抗凝血剂见于某些抗凝外周血和骨髓制备物中。研究显示,标准样品制备物中的 EDTA 和 ACD (柠檬酸-柠檬酸钠-葡萄糖)水平对 SacI 有抑制作用。抑制 SacI 所需肝素的浓度是正常浓度的三倍。(J. E. Coad et al., Inhibition of restriction endonucleases by common clinical anticoagulants.Anal.Biochem.205, 368-369, 1992).有关甲基化敏感性,请参阅产品规格。