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细胞内 pH 校准缓冲液试剂盒
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当细胞内 pH 校准缓冲液试剂盒与 pHrodo™ Red AM、pHrodo™ Green AM 或 BCECF 细胞内 pH 指示器配合使用时,可定量测定细胞内 pH 值。pHrodo™ Red AM 和 pHrodo™ Green AM 在中性 pH 下荧光较弱,但随着 pH 值的下降,荧光增强。pHrodo™ Red 和 Green 染料通过 AM 酯基修饰后可产生一种能渗透细胞膜的不带电分子。一旦进入细胞,亲脂性封闭基团就会被非特异性酯酶裂解,从而形成保留在细胞内空间中的化合物。探针的荧光强度是细胞内 pH 值的指示器。随后使用细胞内 pH 校准缓冲液试剂盒可以对细胞内 pH 进行定量测定。
细胞内 pH 校准缓冲液试剂盒包含一系列 pH 校准缓冲液(pH 4.5、5.5、6.5 和 7.5),以及帮助平衡细胞内外的 pH 值的缬氨霉素和尼日利亚菌素。使用 pHrodo™ Red AM 或 pHrodo™ Green AM 后并在实验条件下检测荧光强度,随后在添加了缬氨霉素和尼日利亚菌素的一种校准缓冲液中重悬细胞,再次检测荧光强度。使用余下的校准缓冲液重复实验以绘制标准曲线,标准曲线可用于确定与实验条件相关的细胞内 pH 值。