直接进行文库制备和多通路测序 起始量低至 10 ng 总 RNA,可在大约7小时内完成文库制备—仅需1小时实操时间。首先使用随附的 SuperScript™ VILO™ cDNA 合成试剂盒处理总 RNA,然后通过 Ion AmpliSeq™ 技术扩增得到的 cDNA,以准确保持所有基因的表达水平。
所得文库可直接采用 Ion OneTouch™ 2 系统或 Ion Chef™ 系统进行下游模板制备并在 Ion Proton™ 测序系统上进行测序。文库可采用条形码标记以进行多通路分析,在提供灵活性的同时,有助于降低成本并提高通量—建议每个 Ion 550 芯片对应16个文库,每个 Ion 540 或 Ion PI 芯片对应8个文库。也可以选择其他多通路选项,这取决于实验设计和所需的灵敏度水平。