重组兔多克隆抗体由重链和轻链库共表达的重组抗体混合物组成。这些抗体通过将多克隆抗体的灵敏度与单克隆抗体的特异性结合,提供了独特优势。此外,它们有助于提供只有重组抗体生产才能实现的一致性。 与传统多克隆抗体类似,重组多克隆抗体能够识别靶分子上的多个表位位点。这种独特特性可提高检测灵敏度,尤其适用于低丰度靶标的检测。然而,重组多克隆抗体的独特之处在于其重链和轻链的已知组成部分,这两者可以在每个生产批次中一致性地复制。这消除了通常与后续多克隆批次复制相关的固有生物变异性。有了重组多克隆抗体,研究人员可以享受到高灵敏度和高重现性的优势,从而为他们的实验和分析提供了可靠且一致的工具。

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为什么选择 Invitrogen 重组兔多克隆抗体?

我们提供种类繁多的抗体,可为各种应用提供解决方案,包括蛋白质免疫印迹、免疫细胞化学、流式细胞术等。我们的抗体经过了严格的先进验证过程,以确保具备最佳性能、特异性和灵敏度。这种全面确认过程可确保研究人员对抗体的可靠性和准确性充满信心。通过选择 Invitrogen 重组抗体,客户可以获取多种产品组合,并信赖我们经过广泛验证的产品的质量和性能。


重组兔多克隆抗体生产

重组兔多克隆抗体的生产依赖于编码基因的重链和轻链的分子克隆。该过程先是使用所需抗原对兔进行免疫,然后是分离和扩增外周血单核细胞 (PBMC) 。然后,将这些细胞的 DNA 克隆为文库,并使用所需的最终应用领域进行进一步筛选,以选择抗体生产的理想候选 DNA 文库。然后, 在体外 使用哺乳动物细胞培养物扩大候选 DNA 文库,然后进行大规模抗体生产。

图1.重组兔多克隆抗体生产。


重组兔多克隆抗体的优势

使用重组 DNA 技术生成的重组兔多克隆抗体具有独特优势,优于传统兔多克隆抗体。它们可提供对抗体序列的精确控制和修改,有助于确保准确的靶向。此外,重组抗体表现出极佳的批次间重现性,因为它们来自于库存 DNA ,避免了细胞漂移并保持一致的表达模式。由于先进的筛选过程,这些抗体还表现出增强的特异性和灵敏度,从而实现最佳结合能力。相比之下,传统兔多克隆抗体可能表现出生产批次间差异,并且具有有限的定制选项。重组兔多克隆抗体的独特特性使其成为寻求可靠、一致和可定制抗体解决方案的研究人员的宝贵选择。

特异性和灵敏度增强

重组兔多克隆抗体具有极佳的特异性和灵敏度。这些抗体经过为评价其结合能力进行的全面的筛选过程,并选择对靶分子亲和力最高的克隆。这种严格的选择过程有助于确保重组兔多克隆抗体特异性识别预期靶标并准确结合。

例如,让我们来看看 SOD1 重组多克隆抗体的示例 (图 1)。这种抗体已成功用于检测不同细胞系中的 SOD1 蛋白,这证明了该蛋白在不同实验环境中的多功能性和可靠性。此外,抗体表现出显著的特异性,从 siRNA 介导的敲低分析获得的结果足以证明这一点。即使在靶蛋白表达减少的条件下,这种重组兔单克隆抗体也保持高特异性,有助于确保准确和可靠检测。

多种应用中改进的抗体性能

大多数重组兔多克隆抗体经过广泛的功能确认过程,以确保在各种应用中实现最佳性能,例如蛋白质免疫印迹、免疫细胞化学、流式细胞术和免疫组织化学。这种全面确认有助于确保我们的抗体始终如一地提供可靠和准确的结果。

例如,在 图 2 中c-Jun 重组多克隆抗体 (2HCLC) 在多种应用中经过了全面确认。其已通过蛋白质免疫印迹、免疫细胞化学和染色质免疫沉淀的广泛检测,以评估其功能和特异性。此外,还通过 CRISPR-Cas9 敲除实验对该抗体进行了进一步特异性评估。通过我们严格的确认程序,我们可以确保抗体符合质量和性能的最高标准,帮助研究人员为其实验提供可靠的工具。

图 2.在不同应用中确认 c-Jun 重组多克隆抗体。A) 对 CoLO 205(泳道 1), U-937(泳道 2),NIH /3T3(泳道 3),HEK-293(泳道 4)和 PC-3(泳道 5)的全细胞提取物进行蛋白质免疫印迹分析。印迹用c-jun 重组多克隆抗体(货号:No. 711202进行探针检测,并用 山羊抗兔IgG(重链)超克隆重组二抗 HRP (货号:No. A27036)进行化学发光检测。检测的各个细胞系中均观察到与 c-jun 对应的 43 kDa 条带。B) 对 PC-3 细胞进行免疫荧光分析以使用相同一抗检测内源性 c-jun。图 A) 显示了染色后用于 c-jun 蛋白 (绿色) 检测和定位的代表性细胞,图 b) 是使用 DAPI 进行染色的细胞核 (蓝色) 。图 c)显示细胞骨架 F- 肌动蛋白染色。图 d)是图 a、b 和 c 的合成图,c 清晰呈现了 c-jun 的核定位。图 E)显示未使用一抗的对照细胞。C) 在来自 U-937 细胞及用茴香霉素处理的 U-937 细胞的剪切染色质上使用相同的一抗进行染色质免疫沉淀(ChIP)正常兔 IgG (1 µg) 用作阴性 IP 对照品。将未处理样品与处理样品之间的数据进行比较,并采用比较 CT 法将数据显示为抗体信号与阴性对照 IgG 的富集倍数。D) 通过 CRISPR-Cas9 基因组编辑实现 c-Jun 的敲除。通过上样 HEK-293 野生型(泳道 -1)、HEK-293 Cas9(泳道 -2)和 HEK-293 c-Jun KO(泳道 -3)修饰的全细胞提取物进行 c-Jun 的蛋白质免疫印迹。使用相同的 c-Jun 重组多克隆抗体和山羊抗兔 IgG 超克隆重组二抗 HRP 对印迹进行探针检测,如上所述。使用 LentiArray CRISPR 产品系列进行 CRISPR 介导的敲除 (KO) 后的信号丧失确证抗体对于 c-Jun 具有特异性。


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*“验证”一词的使用或其他形式仅指研究使用的抗体,这些抗体经过功能测试以确认该抗体可用于指定的研究技术。它不能确保产品已经过临床或诊断用途的验证。

仅供科研使用,不可用于诊断目的。

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