Amplex Red 和 Amplex UltraRed 试剂用途极其广泛，旨在用作酶活性检测的高稳定性和高灵敏度底物，提供：

  • 定量酶活性检测
  • 和传统的比色法氧化酶检测相比，检测动态范围更广、灵敏度更高
  • 荧光发射波长位于化合物自发荧光范围之外
  • 适合高通量应用

 

Amplex Red 试剂技术

Amplex Red 试剂是一种无色底物，可与过氧化氢（H2O2）以1:1的化学计量比发生反应，生成高荧光强度的试卤灵（最大激发/发射波长 = 570/585 nm）（图1）。Amplex Red 反应可用于常规检测100 µL 体积中低至10 pmol 的 H2O2（50 nM，图2），其灵敏度是常用的过氧化氢东莨菪内酯测定法的10倍。在东莨菪内酯测定中，HRP 催化荧光东莨菪内酯转化为非荧光产物。与东莨菪内酯不同，Amplex Red 试剂是一种背景荧光极低的荧光底物。因此，使用 Amplex Red 作为底物的检测可使荧光增加，而非降低——这是一种出色的酶检测方法。 Amplex UltraRed 试剂——第二代 Amplex 底物，表现出更高的抗氧化性，且在较低 pH 环境中效果更好。其适用于具有导致较低反应 pH 的酸性中间体的检测（即使用 Invitrogen EnzChek MPO 活性检测试剂盒的髓过氧化物酶）。

与基于东莨菪内酯的 H2O2 检测相比，Amplex Red 反应的其他优点包括：Amplex Red 试剂及其荧光产物试卤灵具有较高化学稳定性，且试卤灵具有长波长光谱。由于试卤灵的最大激发/发射波长约为570/585 nm（东莨菪内酯为360/460 nm），因此在大多数生物样品中，自发荧光的干扰要小得多。

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图1.使用 Amplex Red 试剂进行偶联酶检测的原理。葡萄糖氧化酶对葡萄糖的氧化导致 H2O2 的产生，这与 HRP 将 Amplex Red 试剂转化为荧光试卤灵有关。

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图2.使用 Invitrogen Amplex Red 过氧化氢/过氧化物酶检测试剂盒检测 H2O2。插图显示了在检测较低含量 H2O2 的灵敏度和线性。

申请定制检测

我们可以提供 定制形式的 Amplex Red 和 Amplex UltraRed 试剂：

  • 用 Amplex UltraRed 试剂替代现有检测中的 Amplex Red 试剂
  • 现有检测的特大包装
  • 构建您自己的酶偶联 Amplex UltraRed 或 Amplex Red 检测

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订购信息

Amplex Red 和 Amplex UltraRed 偶联检测可对多种分析物进行超灵敏定量分析，包括葡萄糖、半乳糖、胆固醇、谷氨酸、黄嘌呤（或次黄嘌呤）、尿酸、胆碱和乙酰胆碱、无机磷酸盐和焦磷酸盐以及过氧化氢。请在下表中查找这些产品或点击查看我们的所有微孔板检测。

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