Miltenyi 微珠与 Dynabeads 磁珠对比 | Thermo Fisher Scientific

孵育 72 小时后，在 T 细胞中检测到 Miltenyi "微珠 " 假影

结果

孵育 72 小时后，T 细胞可保留 Miltenyi 纳米颗粒

您将要查看的内容：

共聚焦、等表面和 TEM 图像显示了 Miltenyi 纳米颗粒在人类 CD3+ T 细胞中的内化情况。
在人类 CD3+ T 细胞囊泡中积聚的 Miltenyi 纳米颗粒。

这意味着：

72 小时后（参见以下新 TEM）， Miltenyi 纳米颗粒未生物降解。相比之下， Dynabeads 从细胞中释放并去除。

注：所有视频图像都是真实的影像，未经修改。
在德国，此网页不允许查看。
Miltenyi 是 Miltenyi Biotech 的商标。Miltenyi Biotech 不属于赛默飞世尔科技，也不由赛默飞世尔科技赞助或支持。

用于创建视频的材料和方法

人类 CD3+ T 细胞对 Miltenyi MicroBeads 的吸收和细胞内积累

Miltenyi 微珠：与酸性囊泡共定位，在人 CD3+ T 细胞中保留 24 小时

细胞和微珠标记

根据生产商的方案，通过梯度离心（LymphoPrep，Axis-Shield）从健康献血者中生成 PBMC ，并在洗涤前在室温下采用 Vybrant 多色细胞标记试剂盒（组分 C ，货号 V22889）标记 30 分钟。在标记过程中滚动试管，避免细胞沉淀。在某些实验中，在孵育过程中加入 LysoTracker Green Dye（货号 L7526）。CD3 微珠（货号 130-050-101 ，德国 Miltenyi Biotec）使用高交叉吸附山羊抗小鼠 IgG（H+L）Alexa 555（货号 A21424）进行标记。由于直接向 PBMC 中添加抗小鼠 IgG Alexa 555 抗体并不会在荧光显微镜中产生信号，因此 CD3 微珠的染色具有特异性。

微珠的检测

根据生产商的流程（德国 Miltenyi Biotec）使用 LS 色谱柱，通过标记的 CD3 微珠分离人 CD3+ T 细胞。立即在 Andor Revolution 转盘显微镜的玻璃盖玻片上对分离的细胞进行分析。以不同的时间间隔捕获帧（例如：每隔一秒，持续 15 分钟或每隔 5 秒，最长 45 分钟）。在某些实验中，将标记的 PBMC（70% 表达 CD3 的细胞）直接接种到玻璃盖玻片上，然后加入标记的 CD3 微珠进行活细胞成像。

查看更多数据

Dynabeads 从细胞中释放 & 出来

阳性细胞分选

了解更多有关 Dynabeads FlowComp的信息

阴性细胞分选

了解更多有关 Dynabeads Untouched的信息

细胞分离的两个世界

孵育 24、48和72小时前后 Miltenyi 纳米颗粒的更多 TEM 图像


	分离后 24 小时：CD3 分离细胞的 Epon 切片在 37°C 下孵育，在高放大倍数下表现出含有 Miltenyi 纳米颗粒（黑色斑点）的大型多囊体。


	分离后 48 小时：CD3 分离细胞的 Epon 切片在 37°C 下孵育。 Miltenyi 纳米颗粒的高放大倍数图像含有电子密集隔室。


	分离后 72 小时：CD3 细胞的 Epon 切片在 37°C 下孵育。 Miltenyi 纳米颗粒在两个相邻 CD3 阳性细胞的不同细胞内隔室中。

避免假影 - 使用 Dynabeads

Miltenyi 与 Dynabeads 对比表

Miltenyi 微珠		Dynabeads FlowComp™
约 50 nm	规格	2.8µM
无	均一性	球形， 1-3% 差异
否	T 细胞是否释放？	是
是	是否需要色谱柱？	否
是	是否内化于 T 细胞中？	否
是	保留在 T 细胞中 72 小时后？	否