小动物活体成像常见问题解答

• 标记程度（DOL）描述了每个抗体的荧光基团数量。  对于体内标记实验，DOL 限制在一个狭窄范围内，因为其对探针的生物分布和清除具有显著影响。 已经确定 NIR Alexa Fluor 染料的 DOL 范围为1.5-3 个分子/抗体，以获得最佳体内光学成像结果。
  
  

• 应采用 PBS 缓冲液配制抗体，浓度为0.5-3.0 mg/mL。抗体不得含有防腐剂（叠氮化物等）、含胺缓冲液和载体蛋白（如 BSA）。

• 由于皮毛可引起光散射，建议将无毛小鼠（如无胸腺纯系裸鼠 [nu/nu]）用于体内成像。如果无法使用无毛小鼠，应使用剪刀或化学脱毛剂（如 Nair™）去除覆盖待成像区域的毛发。
  
  

• 可注射的试剂体积因给药途径而异。（以下数字适用于 25 g 的动物）

应使用多大的针头？

• 建议使用带有固定（不可拆卸）针头的 28-32 号结核菌素或胰岛素注射器（容量为 0.3 或 1.0 mL）。
  
  

应注射多大剂量的非靶向 QTracker 来对血管成像？

• 推荐起始剂量为25-50 μL QTracker，用 PBS 稀释至所需注射体积。QTracker 应在临注射前稀释。请勿稀释储存。最终用户需要确定其实验模型的最佳剂量。
  
  

应注射多大剂量的偶联抗体对肿瘤进行成像？

• 建议起始剂量为50 µg。最终用户需要确定其实验模型的最佳剂量。
  
  

如何激发量子点进行体内成像？

• 量子点可被低于发射峰值波长的410 nm 至40 nm 波长范围内的光激发。例如，可以采用410-615 nm 的光激发 QTracker 655 非靶向量子点。请记住，产品名称中的波长是指发射峰，而非激发峰。
  
  

未偶联染料在小鼠体内会发生什么？

• 水解染料将通过膀胱消除。静脉注射后3分钟内可检测到膀胱信号。
  
  

注射后多久应开始对小鼠进行成像？

• 成像时程随注射试剂的性质而变化。血管示踪剂注射后立即可在血管中观察到，且可在数小时内成像。偶联的全 IgG 抗体在注射后几小时内到达其靶标，且可以在数天内成像。
  
  

Alexa Fluor 染料的荧光寿命是多久？

• 20℃ 时 Alexa Fluor 647 染料在 H2O 中的荧光寿命（τ）为1.0 ns，在 EtOH 中为1.5 ns。
• 20℃ 时 Alexa Fluor 680 染料在 pH 7.5缓冲液中的荧光寿命（τ）为1.2 ns。
• 22℃ 时 Alexa Fluor 750 染料在 H2O 中的荧光寿命（τ）为0.7 ns。