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Lipofectamine MessengerMAX mRNA 转染试剂在神经元和广谱原代细胞中提供了惊人的转染效率,从而能改善应用结果和进行更多的生物学相关研究。这是因为我们的新型脂质纳米微粒技术经过优化,能够在没有 DNA 所需的入核步骤的情况下递送尽可能多的 mRNA。
图 1.在原代细胞(新鲜分离的小鼠皮质神经元、BJ 成纤维细胞和原代角质形成细胞)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 递送试剂和领先的 mRNA 递送试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 传递试剂用于以 24 孔的形式传递 GFP mRNA(500ng/孔)。领先的 DNA 传递试剂用于传递 GFP DNA(500ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图 2.在各种干细胞(Gibco iPSC、H9 ESC、mESC、hNSC)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 递送试剂和领先的 mRNA 递送试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 递送试剂用于在 48 孔板中递送 GFP mRNA(250 ng/孔)。领先的 DNA 递送试剂用于递送 GFP DNA(250 ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图3.在各种非常难以转染的细胞系((bEnd.3、SH-SY5Y、SK-N-SH、A431、RAW 264.7 和 HT29)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 传递试剂和领先的 mRNA 传递试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 传递试剂用于在 24 孔板中递送 GFP mRNA(500ng/孔)。领先的 DNA 传递试剂用于传递 GFP DNA(500ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图 1.在原代细胞(新鲜分离的小鼠皮质神经元、BJ 成纤维细胞和原代角质形成细胞)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 递送试剂和领先的 mRNA 递送试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 传递试剂用于以 24 孔的形式传递 GFP mRNA(500ng/孔)。领先的 DNA 传递试剂用于传递 GFP DNA(500ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图 2.在各种干细胞(Gibco iPSC、H9 ESC、mESC、hNSC)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 递送试剂和领先的 mRNA 递送试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 递送试剂用于在 48 孔板中递送 GFP mRNA(250 ng/孔)。领先的 DNA 递送试剂用于递送 GFP DNA(250 ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
图3.在各种非常难以转染的细胞系((bEnd.3、SH-SY5Y、SK-N-SH、A431、RAW 264.7 和 HT29)中,Lipofectamine MessengerMAX 的表现优于领先的 DNA 传递试剂和领先的 mRNA 传递试剂。Lipofectamine MessengerMAX 和领先的 mRNA 传递试剂用于在 24 孔板中递送 GFP mRNA(500ng/孔)。领先的 DNA 传递试剂用于传递 GFP DNA(500ng/孔),并在转染 24 小时后分析 GFP。
虽然 DNA 转染是用于表达目的基因的最常用方法,但这个过程涉及多个步骤,包括 DNA 进入细胞核。DNA 进入细胞核通常是最难转染的步骤之一,特别是在难以转染的细胞中。
相比之下, mRNA 转染比 DNA 转染更简单,因为 mRNA 转录物可以直接递送到细胞中 ,无需进入细胞核 (步骤 4 ,图 4) 进行表达。此外, mRNA 转染独立于细胞周期,有助于消除基因组整合风险。
Lipofectamine MessengerMAX 转染试剂专门设计用于 mRNA 转染,可在转染细胞中实现快速蛋白表达,同时使其表达均一。
图4.DNA 与 mRNA 转染。
Lipofectamine MessengerMAX 试剂通过高效转染,提高用 Invitrogen GeneArt CRISPR 核酸酶 mRNA 切割和重组的可能性,最大限度地提高 CRISPR 驱动的基因修饰效率,并简化下游流程。
图 5.在 12 孔板中针对 Gibco iPS 细胞的 HPRT 位点的各种 Invitrogen GeneArt CRISPR 模式的切割效率。Invitrogen Lipofectamine 3000 试剂用于递送 CRISPR 核酸酶一体化质粒 DNA;Lipofectamine MessengerMAX 和两种领先的 mRNA 递送试剂用于递送全 RNA CRISPR 形式(Cas9 mRNA + IVT gRNA)。在转染后 72 小时,使用 Invitrogen GeneArt 基因组切割检测试剂盒测定切割效率。
用 T7 启动子准备 DNA 模板。您可选择用 Invitrogen Gateway pcDNA-DEST40 载体来克隆基因,或者用 PCR 和含 T7 的引物进行扩增。
用 Invitrogen mMESSAGE mMACHINE T7 超转录试剂盒转录模板 DNA,以产生用于转染的 mRNA。
用简单的 Lipofectamine MessengerMAX 转染方案来转染 mRNA。
下载 Lipofectamine MessengerMAX 实验方案
用 T7 启动子准备 DNA 模板。您可选择用 Invitrogen Gateway pcDNA-DEST40 载体来克隆基因,或者用 PCR 和含 T7 的引物进行扩增。
用 Invitrogen mMESSAGE mMACHINE T7 超转录试剂盒转录模板 DNA,以产生用于转染的 mRNA。
用简单的 Lipofectamine MessengerMAX 转染方案来转染 mRNA。
下载 Lipofectamine MessengerMAX 实验方案
细胞类型 | Lipofectamine MessengerMAX 转染效率(%) |
---|---|
MDA-MB-231 | ![]() |
A431 | ![]() |
A549 | ![]() |
bEnd.3 | ![]() |
BJ 成纤维细胞 | ![]() |
H9 ESCs | ![]() |
原代肝细胞 | ![]() |
Hep G2 | ![]() |
HT-29 | ![]() |
iPSC | ![]() |
原代角质形成细胞 | ![]() |
L929 | ![]() |
LNCaP | ![]() |
hNSC | ![]() |
MCF7 | ![]() |
Neuro-2a | ![]() |
原代神经元 | ![]() |
RAW 264.7 | ![]() |
RBL | ![]() |
SK-N-SH | ![]() |
SH-SY5Y | ![]() |
转染效率(%)*<30% 30~50%
51~79%
>80%
为了帮助确保转染结果的有效性,强烈建议使用阳性对照 mRNA(可从不同的第三方供应商获取),包括 TriLink BioTechnologies(如 EGFP mRNA)。
包装必须保护内部的产品——但这并不意味着必须牺牲可持续性。Lipofectamine 产品以常温运输,每年将 24,000 立方英尺的膨胀聚苯乙烯(EPS)冷却箱从垃圾填埋场中回收。我们通过包装和运输这些产品,减少了 80 吨(CO2 当量)的碳足迹。
我们的 Lipofectamine 试剂特异性方案针对多种细胞类型在效率、活率和可重复性方面进行了优化。搜索该数据库,找到满足您实验需求的方案和参考文献。按细胞类型、递送物质和选择的产品进行筛选,可以轻松找到您需要的答案。
请搜索我们广泛的转染常见问题解答集,以查找与Lipofectamine RNAiMAX试剂相关的答案。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。