Arcturus® Paradise® PLUS 全转录本 RT (WT-RT) 试剂系统

Life Technologies 的 Applied Biosystems® Arcturus® Paradise® PLUS 全转录本 RT (WT-RT) 试剂系统提供了一种高效可靠的解决方案，可纯化从存档的福尔马林固定石蜡包埋 (FFPE) 组织样本中提取的 RNA，然后逆转录整个转录本以用于实时荧光定量 PCR。

主要产品特点

FFPE 样本为基因表达谱分析和基因表达定量测定带来了独特的挑战，包括 RNA 分子的化学修饰和片段化。由于 RNA 降解随时间推移增加，因此 FFPE 样本的存档也成为挑战之一。

对 Paradise® PLUS WT-RT 试剂系统进行了专门开发和特别优化，以从存档 20 年以上的 FFPE 样本中获得的高度片段化 RNA 中提供高质量的 RNA 和稳健的逆转录 (RT)（图 2）。


  • 简单的工作流程—较少的样本处理操作过程，减少了污染的几率（图 3）
  • 有效的 RNA 提取和分离—有助于节省时间并尽可能减少样本损失
  • 经优化的 RT 反应—生成可代表整个转录本长度的 cDNA
  • 准确的转录本分析—结果代表高、中、低丰度表达基因 

从存档的 FFPE 组织进行经优化的 RNA 提取和分离

表 1 显示了使用 Paradise® PLUS WT-RT 试剂系统和类似的市售方案获得的总 RNA 得率之间的比较。三次重复分离的平均得率证明了使用 Paradise® PLUS WT-RT 试剂系统获得的总 RNA 的丰度。Paradise® PLUS WT-RT 试剂系统可产生大量的总 RNA，用于逆转录和后续 qPCR 分析，比使用类似的市售产品处理相同样本时获得的总RNA多三倍。

表 1.使用 Paradise® PLUS WT-RT 试剂系统和类似的市售方案获得的总 RNA 得率之间的比较。

样本 ID样本年龄260/280RNA 分离方案平均得率 (ng)
 9055 1 年 WT-RT1.94 7592.8
 供应商 A2.05 2086.3
 8090 10 年 WT-RT1.95 784.4
 供应商 A2.45247.4

能够在多种靶标范围内进行出色的扩增

对 Paradise® PLUS WT-RT 试剂系统的灵敏度与市面上生成用于实时荧光定量 PCR 反应的 cDNA 的类似试剂产品进行比较。使用 Paradise® PLUS 产品时，所有高、中、低表达基因的 Ct 值均有所改善（图 2）。使用与转录本 3’-末端相距不同距离（500 bp 至 5 kb）的外显子跨区引物，与其他市售产品相比，显示出了更高的灵敏度和更高的转录成功率。Paradise® PLUS WT-RT 试剂系统成功扩增了所有基因，因为试剂盒中提供的试剂已经过优化，可协同工作，不仅节省了您的时间和精力，同时也在整个转录本中产生了高质量结果。

 图 2.使用 Paradise® PLUS 产品时，所有高、中、低表达基因的 Ct 值均有所改善。

完备的 Microgenomics® 系统

Paradise® PLUS 试剂系统已作为 Arcturus® 完备系统（一种利用少量 RNA 进行基因表达分析的集成式解决方案，适用于 Microgenomics®）的一部分进行了验证，并且配备了用来获得纯细胞群的 Arcturus 激光捕获显微切割 (LCM) 仪器。适用于微基因组学的 Arcturus 系统可实现准确、灵敏的微阵列测定，这些测定可揭示在全组织样本或细胞混合物中会被掩盖的分子特征。

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仅供研究使用。不可用于诊断程序。