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Invitrogen AccuPrime DNA 聚合酶利用 AccuPrime 辅助蛋白提高 PCR 保真度、产量和特异性。AccuPrime 技术可用于 Taq、Pfx 和高 GC 含量产品形式。
耐热 AccuPrime 辅助蛋白在每个 PCR 循环中可增强特异性引物与模板的结合,防止错误结合并提高 PCR 的特异性和产量。此外,AccuPrime 酶经设计含有特定于 DNA 聚合酶的抗体,可在室温下抑制其活性并实现自动热启动。
对用于高保真 PCR、热启动 PCR 和高 GC 含量模板PCR 的 Platinum DNA 聚合酶和 AccuPrime DNA 聚合酶的性能进行比较。
Platinum SuperFi DNA 聚合酶 | AccuPrime Taq 高保真 DNA 聚合酶 | AccuPrime Pfx DNA 聚合酶 | |
---|---|---|---|
保真度(相对于 Taq) | >300x | 9x | 26x |
热启动修饰 | |||
扩增子长度范围 | 20 kb* | ≤20 kb (with Buffer II) | ≤12 kb |
扩增子突出端 | 平末端 | 3′A 和平末端 | 平末端 |
是否可扩增高 GC含量模板 | 否 | 否 | |
抑制剂耐受性 | 否 | 否 | |
DNA 合成速率 | 15–30 sec/kb | 60 sec/kb | 60 sec/kb |
残留细菌 gDNA | ≤1 拷贝/酶单位 | 未检测到 | 未检测到 |
缓冲液体系 | 一种统一经优化的缓冲液 (单独提供GC enhancer) | 两种缓冲液 (基于模板类型) | 一种缓冲液 |
产品形式 | 单酶: 无色 绿色† 预混液: 无色 绿色† | 单酶: 无色 | 单酶: 无色 |
* 可扩增长达 40 kb,但可能需要额外优化反应条件和引物设计
† 包含绿色缓冲液,其中含有密度试剂和两种示踪染料,可直接凝胶上样进行电泳
Platinum II Taq DNA 聚合酶 | AccuPrime Taq DNA 聚合酶系统 | |
---|---|---|
热启动修饰 | ||
保真度(相对于 Taq) | 1x | 2x |
扩增子长度范围 | ≤5 kb | ≤5 kb |
抑制剂耐受性 | 否 | |
DNA 合成速率 | 15 sec/kb | 60 sec/kb |
扩增子突出端 | 3′A | 3′A |
通用引物退火 | 否 | |
残留细菌 gDNA | ≤1 拷贝/酶单位 | 未检测到 |
是否可扩增高 GC含量模板 | 否 | |
多重扩增 | 多达 15 重 | 多达 20 重 |
缓冲液体系 | 一种统一经优化的缓冲液 (单独提供GC enhancer) | 两种缓冲液 (基于模板类型) |
产品形式 | 单酶: 无色 预混液: 无色 绿色† | 单酶: 无色 |
† 包含绿色缓冲液,其中含有密度试剂和两种示踪染料,可直接凝胶上样进行电泳
Platinum SuperFi DNA 聚合酶 | Platinum II Taq DNA 聚合酶 | AccuPrime 高 GC 含量 DNA 聚合酶 | |
---|---|---|---|
高 GC 含量模板扩增 | >65% GC | >65% GC | >65% GC |
热启动修饰 | 否 | ||
保真度(相对于 Taq) | >100x | 1x | 2x |
扩增子长度范围 | 20 kb* | ≤5 kb | ≤5 kb |
扩增子突出端 | 平末端 | 3′A | 平末端 |
抑制剂耐受性 | 否 | ||
DNA 合成速率 | 15–30 sec/kb | 15 sec/kb | 60 sec/kb |
通用引物退火 | 否 | 否 | |
残留细菌 gDNA | ≤1 拷贝/酶单位 | ≤1 拷贝/酶单位 | 未检测到 |
缓冲液体系 | 一种优化缓冲液 (单独提供GC enhancer) | 一种优化缓冲液 (单独提供GC enhancer) | 双缓冲液系统 (基于 GC%含量) |
产品形式 | 单酶: 无色 绿色† 预混液: 无色 绿色† | 单酶: 无色 预混液: 无色 绿色† | 单酶: 无色 |
* 可扩增长达 40 kb,但可能需要额外优化反应条件和引物设计
† 包含绿色缓冲液,其中含有密度试剂和两种示踪染料,可直接凝胶上样进行电泳
Platinum SuperFi DNA 聚合酶 | AccuPrime Taq 高保真 DNA 聚合酶 | AccuPrime Pfx DNA 聚合酶 | |
---|---|---|---|
保真度(相对于 Taq) | >300x | 9x | 26x |
热启动修饰 | |||
扩增子长度范围 | 20 kb* | ≤20 kb (with Buffer II) | ≤12 kb |
扩增子突出端 | 平末端 | 3′A 和平末端 | 平末端 |
是否可扩增高 GC含量模板 | 否 | 否 | |
抑制剂耐受性 | 否 | 否 | |
DNA 合成速率 | 15–30 sec/kb | 60 sec/kb | 60 sec/kb |
残留细菌 gDNA | ≤1 拷贝/酶单位 | 未检测到 | 未检测到 |
缓冲液体系 | 一种统一经优化的缓冲液 (单独提供GC enhancer) | 两种缓冲液 (基于模板类型) | 一种缓冲液 |
产品形式 | 单酶: 无色 绿色† 预混液: 无色 绿色† | 单酶: 无色 | 单酶: 无色 |
* 可扩增长达 40 kb,但可能需要额外优化反应条件和引物设计
† 包含绿色缓冲液,其中含有密度试剂和两种示踪染料,可直接凝胶上样进行电泳
Platinum II Taq DNA 聚合酶 | AccuPrime Taq DNA 聚合酶系统 | |
---|---|---|
热启动修饰 | ||
保真度(相对于 Taq) | 1x | 2x |
扩增子长度范围 | ≤5 kb | ≤5 kb |
抑制剂耐受性 | 否 | |
DNA 合成速率 | 15 sec/kb | 60 sec/kb |
扩增子突出端 | 3′A | 3′A |
通用引物退火 | 否 | |
残留细菌 gDNA | ≤1 拷贝/酶单位 | 未检测到 |
是否可扩增高 GC含量模板 | 否 | |
多重扩增 | 多达 15 重 | 多达 20 重 |
缓冲液体系 | 一种统一经优化的缓冲液 (单独提供GC enhancer) | 两种缓冲液 (基于模板类型) |
产品形式 | 单酶: 无色 预混液: 无色 绿色† | 单酶: 无色 |
† 包含绿色缓冲液,其中含有密度试剂和两种示踪染料,可直接凝胶上样进行电泳
Platinum SuperFi DNA 聚合酶 | Platinum II Taq DNA 聚合酶 | AccuPrime 高 GC 含量 DNA 聚合酶 | |
---|---|---|---|
高 GC 含量模板扩增 | >65% GC | >65% GC | >65% GC |
热启动修饰 | 否 | ||
保真度(相对于 Taq) | >100x | 1x | 2x |
扩增子长度范围 | 20 kb* | ≤5 kb | ≤5 kb |
扩增子突出端 | 平末端 | 3′A | 平末端 |
抑制剂耐受性 | 否 | ||
DNA 合成速率 | 15–30 sec/kb | 15 sec/kb | 60 sec/kb |
通用引物退火 | 否 | 否 | |
残留细菌 gDNA | ≤1 拷贝/酶单位 | ≤1 拷贝/酶单位 | 未检测到 |
缓冲液体系 | 一种优化缓冲液 (单独提供GC enhancer) | 一种优化缓冲液 (单独提供GC enhancer) | 双缓冲液系统 (基于 GC%含量) |
产品形式 | 单酶: 无色 绿色† 预混液: 无色 绿色† | 单酶: 无色 预混液: 无色 绿色† | 单酶: 无色 |
* 可扩增长达 40 kb,但可能需要额外优化反应条件和引物设计
† 包含绿色缓冲液,其中含有密度试剂和两种示踪染料,可直接凝胶上样进行电泳
下表总结了所提供的 AccuPrime DNA 聚合酶及形式。
AccuPrime Taq DNA Polymerase, High Fidelity | AccuPrime Pfx DNA Polymerase | AccuPrime GC-Rich DNA Polymerase | AccuPrime Taq DNA Polymerase System | |
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所含DNA 聚合酶 | Taq DNA 聚合酶和校正 GB-D 酶(来自火球菌属)的混合物 | 来自Thermococcus 属的重组 KOD 酶 | 克隆自Pyrolobus fumarius 的 DNA 聚合酶 | AccuPrime Taq DNA 聚合酶 |
热启动修饰 | 否 | |||
利用 AccuPrime 辅助蛋白提高特异性 | ||||
保真度 (相对于 Taq) | 9x | 26x | 2x | 2x |
扩增子突出端 | 3′A 和平末端 | 平末端 | 平末端 | 3′A |
产品形式 | 单酶,含双缓冲液系统: 缓冲液 I用于质粒、cDNA 和 λ DNA; 缓冲液 II 用于 gDNA。 | 单酶 | 单酶,含双缓冲液系统: 缓冲液 A用于高 GC 含量 gDNA 靶标; 缓冲液 B 用于非高 GC 含量 gDNA、cDNA、质粒和 λ DNA。 | 单酶,含双缓冲液系统: 缓冲液 I 用于小 gDNA 扩增子 (≤200 bp)、cDNA 和质粒; 缓冲液 II 用于 gDNA (200 bp–4 kb)。 |
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