使用质谱仪进行完整蛋白质表征

使用质谱仪进行完整蛋白质表征

必须对生物治疗药物进行全面表征,以满足监管机构设定的安全标准,并帮助确保蛋白质类药物的疗效。 使用液相色谱 (LC) 和质谱 (MS) 联用进行完整蛋白质分析,有助于了解蛋白质的准确质量及其异构体的相对丰度。 高分辨率高质量精度(HRAM)仪器分析使这些复杂异质蛋白类生物治疗药物的分析得到了显著提升。 HRAM 与功能强大的数据反卷积算法相结合,有助于蛋白修饰的结构确认和准确鉴定。


完整质量分析和天然质谱分析

在药物开发和生产的所有阶段都需要进行生物治疗药物表征。 在药物开发过程中,液相色谱–质谱 (LC-MS) 方法可用于在结构上表征通过细胞系产生的单克隆抗体(mAb) 。 其主要目的是确定哪些单克隆细胞群可产生针对特异性抗原的高保真、高活性 mAb。 完整生物制品分析在整个制造业中持续用于评估批次发布的纯度和异质性特征。

可采用多种分析方法来评估完整的生物治疗药物分子。 在简短脱盐步骤之后进行 MS 分析,可获得关于准确蛋白质量和异质性的信息,此信息对于各种糖型和蛋白质变体的定量分析十分重要,也是治疗药物配方和储存需要重点考量的因素。 在还原和/或消化之后,即可在亚单位水平对生物治疗药物进行分析。 治疗性抗体亚单位分析有助于对其重链和轻链进行精确的分子量分析,而进一步的自上而下分析可进行序列确认。

在天然或接近天然的条件下进行蛋白分析可降低电荷状态值,从而能在更高的 m/z 范围内以更清晰的空间分辨率来检测 mAb。 例如,天然质谱条件还可以保留在结构上至关重要的非共价键,这些键对于分析半胱氨酸结合的抗体药物偶联物(ADC)可能很有必要。


特色完整蛋白质分析学习内容

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请关注质谱分析专家 Stephane Houel 博士,他在美国药学科学家协会 (AAPS) 会议上展示了这份关于使用完整蛋白质质谱分析表征抗体药物偶联物的海报。

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请关注生物制药色谱分析专家 Shanhua Lin 博士,她在 HPLC 2016 会议上论述了一份海报,该海报详细介绍了用于抗体亚单位表征的新方法。

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请关注色谱分析专家 Shane Bechler 博士,他展示了一种利用质谱系统从快速、可重现工作流程的高盐溶液中快速纯化治疗性蛋白的简单方法。


完整蛋白质分析文献库

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