质膜是一种选择性渗透性磷脂双分子层,环绕在细胞质周围,将细胞内成分与细胞外环境分隔开来。它主要由蛋白质和脂质组成,并在信号转导途径中发挥作用。质膜还固定细胞骨架,赋予细胞形状,并作为细胞外基质和周围细胞的附着点,帮助它们聚集在一起形成组织。

质膜标记物抗体可检测质膜特异性蛋白,并帮助研究质膜的形态和动力学。质膜标记物抗体还可以帮助阐明蛋白质在质膜中心的任务中可能发挥的作用,如转运体、受体、锚定蛋白、酶等。

Invitrogen 质膜标记物抗体旨在可靠地检测关键质膜靶点。每种抗体都经过验证可用于各种应用。主要质膜靶点包括:

质膜抗体靶点

应用

每种 Invitrogen 质膜标记物抗体都经过验证,可用于 ELISA、蛋白质印迹、流式细胞分析、免疫荧光、免疫组织化学技术、免疫细胞化学技术和免疫沉淀等应用。

GAPDH 的蛋白免疫印迹分析

对膜富集提取物(30 μg 裂解物)进行蛋白质印迹分析,样品包括: µg MCF7(泳道 1)、 A-431(泳道 2)、H1975(泳道 3)、PC-3(泳道 4)、PC-3(泳道 4)、De-145(泳道 5)、MB-231(泳道 6)、Ramos(泳道 7)、HEK-293(泳道 8)、3T3-L1(泳道 9)、Jurkat(泳道 10)和 A549(泳道 11)。使用 兔抗GRB2多克隆抗体(货号:PA5-17692,1:1000 稀释)对 blot 进行探测,并使用 山羊抗兔 IgG(H+L)Superclonal 二级抗体,HRP 标记(货号:A27036,0.25 µg/mL,1:4000 稀释)通过化学发光法进行检测。检测的各个细胞系中均观察到与 GRB2 对应的 25 kDa 条带。使用 Novex NuPAGE 12% Bis-Tris凝胶(货号:NP0342BOX)XCell SureLock 电泳系统(货号:Ei0002)Novex Sharp 预染蛋白标准品(货号:LC5800)对已知数量的蛋白样品进行电泳。随后,使用 iBlot 2 干转印系统(货号:IB21001)将分离后的蛋白质转印到硝酸纤维素膜上。用 5% 脱脂乳封闭后,用相关的一抗和二抗对膜进行探测。使用 Pierce ECL 蛋白免疫印迹底物(货号号 32106)进行化学发光检测。

ZO-1 的免疫荧光分析

MDCK 细胞中 ZO-1 的免疫荧光检测。将汇合细胞单层固定在 50% 甲醇/50% 丙酮中,在 1% BSA 中封闭至少 30 分钟,然后用 5 µg/mL 浓度 ZO-1 单克隆抗体(货号µg 33-9100) 孵育 2 小时,洗涤,再用 Alexa Fluor 488 偶联驴抗小鼠二抗 (货号21202) 以 1:2000 的稀释度孵育 1 小时。使用 DAPI(蓝色)复染细胞。使用 ProLong Gold 抗淬灭试剂(货号 P36930) 封片载玻片,并在 40 倍放大镜下成像。图像由 Fred Hutchinson 癌症研究中心 Paul Lampe 实验室的 Joell Solan 生成。