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DynaGreen 免疫沉淀磁珠用于免疫沉淀的可持续高性能磁珠。 |
使用不含微塑料的 DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠获得高质量结果
Thermo Fisher Scientific的DynaGreen Protein A、Protein A/G和CaptureSelect Anti-IgG-Fc (Multi-species)磁珠是一种高磁性亚微米级磁珠平台，从生产到客户交付都采用了开创性的绿色环保设计。基于 Dynal 在生物分子捕获领域的坚实基础，Dynabeads 磁珠背后的团队将30多年的经验与12项绿色化学原则相结合，创造出高性能、不含微塑料的磁珠，可提供可重复的结果，且非特异性结合低。该选择对环境来说是更好的选择，符合更环保的实验室政策，同时又不影响结果的质量。DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠用于免疫沉淀 (IP)，是我们不断壮大的可持续磁珠阵容中的首批产品。
DynaGreen磁珠为可持续科学做出贡献的七种方式
DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠的生产源于人们对更可持续的研究实验室的渴望和需求。每个开发步骤都应用了12项绿色化学原则，打造出对您的工作和环境都有好处的产品。以下是DynaGreen 磁珠如何为更可持续的科学做出贡献：
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- 不含塑料微粒—DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠完全由自然界中常见的无机材料组成，包括二氧化硅和氧化铁。
- 简化生产流程—我们大幅度地简化了生产流程，以缩短生产时间，减少能源和水的消耗。
- 可持续性化学品—与其他磁珠相比， DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠生产过程中使用了更多可持续的化学品，如生物可再生溶剂，而且它们可以储存在含有更环保的表面活性剂和生物杀灭剂的缓冲液中。
- 灵活性—磁珠不包含缓冲液。用户指南中提供了易于使用常见实验室化学品轻松制备的缓冲液配方。这样可以减轻运输重量，从而减少燃料消耗。
- 无纸化—所有必备文件均为电子文件（无纸化），并且可以通过二维码访问。
- 可持续包装—DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc磁珠采用可回收材料进行高效包装，并可在室温条件下运输。我们提供可回收说明。产品运输时不使用塑料或聚苯乙烯泡沫塑料包装运输。
- 透明度—我们通过第三方验证保持可持续发展的透明度——DynaGreen 产品均贴有 ACT 标签。
用于免疫沉淀的高性能 DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠
我们测试了 DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠与竞争对手磁珠的提取效率。与 Thermo Fisher Pierce、Promega、Sigma 和 Bio-Rad 的磁珠相比，DynaGreen 蛋白 A 磁珠对高丰度目标蛋白（CD3）的提取质量更高（图 1A）。在直接和间接 IP 工作流程中，DynaGreen 蛋白 A 磁珠的表现都优于所有竞争对手。
对 DynaGreen Protein A/G 磁珠拉低低丰度目标蛋白（CD81）的 Western 印迹分析表明，与 Thermo Fisher Pierce、GenScript、Millipore、Sigma 和 Bio-Rad 的磁珠相比，DynaGreen Protein A/G 磁珠的拉低效率相似或更高（图 1B）。在间接 IP 工作流程中，DynaGreen Protein A/G 磁珠的表现优于所有竞争对手。Thermo Scientific DynaGreen CaptureSelect Anti-IgG-Fc (Multi-species) 珠子的 IP 最干净，同时拉取的目标物量与 Thermo Scientific Pierce 蛋白 A/G 磁珠（间接 IP 工作流程）、Cytiva™ Sera-Mag™ SpeedBeads 蛋白 A/G 磁珠和 Bio-Rad™ SureBeads™ 蛋白 G 磁珠（直接 IP 工作流程）相当。
A
B
图 1. DynaGreen 磁珠的性能相当或更好。(A) DynaGreen Protein A 磁珠与其他五种竞争微珠在间接和直接 IP 高丰度蛋白目标 CD3 时的比较。Lane 1: Promega Magnet Protein A (Promega), lane 2: DynaGreen Protein A (Thermo Fisher), lane 3: Protein Xtra Sepharose Protein A (Cytiva – Sigma), lane 4: Pierce Protein A (Thermo Fisher), lane 5: Dynabeads Protein A (Thermo Fisher), lane 6: DynaGreen Protein A (Thermo Fisher), lane 7: 空白/无样品, lane 8: Protein A Magnetic Sepharose (Cytiva – Sigma), and lane 9: SureBeads Protein A (BioRad). (B) DynaGreen Protein A/G 磁珠与其他十种竞争微珠在低丰度蛋白目标 CD81 的间接和直接 IP 上的比较。Lane 1: SeraMag Speed bead protein A/G (Sigma), lane 2: CaptureSelect IgG-Fc (ms) Magnetic Agarose Beads (Thermo Fisher), lane 3: Protein Xtra Sepharose, Protein G (Cytiva – Sigma), lane 4: Pierce Protein G (Thermo Fisher), lane 5: Pierce Protein A/G Magnetic Beads (Thermo Fisher), lane 6: DynaGreen Anti IgG-Fc (Thermo Fisher), lane 7: DynaGreen Protein A/G (Thermo Fisher), lane 8: GenScript Protein A/G Mag beads (GenScript), lane 9: Dynabeads Protein G (Thermo Fisher), lane 10: DynaGreen Protein A/G (Thermo Fisher), lane 11: DynaGreen Anti IgG-Fc (Thermo Fisher), lane 12: PureProteome Protein A/G Magnetic System (Millipore), lane 13: PureProteome Protein G Magnetic System (Millipore), lane 14: Protein G Magnetic Sepharose (Cytiva – Sigma), and lane 15: SureBeads Protein G (BioRad). 根据各生产商的实验方案，所有 IP 方案均使用等量的 Ab 样品和细胞裂解液。
DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 Anti-IgG-Fc 磁珠选择指南
| 何时使用 |
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| 结合能力 | 13–14 µg/mL | ||
| 粒径 | 250 nm | ||
| 浓度 | 20 mg/mL | ||
| 所需的磁珠用量 / IP | 25 µl* | ||
| 产量 | 高 | 高 | 中 |
| 非特异性结合 | 低 | 低 | 极低 |
| 实验方案 | 直接和间接免疫沉淀，质谱 | ||
| 自动化 | 自动化—可用于 KingFisher 样品纯化系统的方案 | ||
| 可回收的原始包装 | 是—随包装说明书以电子方式提供回收说明 | ||
| 可持续性 | ACT 标签对产品、生产操作及其生命周期的可持续影响进行第三方验证 | ||
*高结合能力意味着每个 IP 需要磁珠的用量更小。竞争对手通常使用 40 – 100 µl。
如何在实验室中使用DynaGreen磁珠
使用 DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠进行免疫沉淀
免疫沉淀 (IP) 是使用固定在磁珠等固相支持物上的特异性抗体对蛋白质、蛋白质复合物、蛋白质-核酸复合物和其他抗原 (Ag) 进行亲和纯化。DynaGreen 磁珠是一种 250 纳米的超顺磁性磁珠，可实现高性能的直接和间接免疫沉淀 (IP)。DynaGreen 磁珠的亚微米级尺寸增加了可用的目标捕获表面积，沉降率低，从而能在无需预清除的简单混合-孵育-静置免疫沉淀方案中高效分离目标蛋白质。所采用的磁性分离技术也非常快速温和，因此对目标蛋白质造成的物理压力极小。
DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠的其他优点包括：
- 采用直接和间接IP方案后，可实现可重复性、高得率 和 样品纯度（图2）
- 适用下游IP检测（如蛋白质印迹和质谱分析）的 可调实验方案
- 可持续 的整体产品设计，包括 节能 生产、 可回收 包装和 非微塑料 磁珠内核
- ACT 标签——环境影响的第三方验证
- 以Dynabeads 30 年的质量和创新为后盾
- 与Thermo Scientific KingFisher 系统自动化兼容 — 从按下按钮到完成样品制备仅需40分钟
图 2. 用于免疫沉淀（IP）的 DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠。(A) 直接 IP 的第一步是：1）将您选择的抗体加入 DynaGreen 磁珠中 30 分钟；2）将样品加入抗体-磁珠混合物中 30 分钟；3）洗涤磁珠以去除未结合的非特异性结合；4）用洗脱缓冲液洗脱磁珠中的目标蛋白质。(B) 间接 IP 首先要做的是：1）将您选择的抗体加入样品中 30 分钟；2）将 DynaGreen 磁珠加入样品-抗体混合物中 30 分钟；3）洗涤磁珠以去除未结合的非特异性结合；4）用洗脱缓冲液洗脱磁珠上的目标蛋白。
如何洗脱Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠
在磁珠-配体-抗体复合物孵育和洗涤步骤之后，洗脱是直接 IP 和间接 IP 的最后一步。在抗体、磁珠和样品充分孵育后，洗涤Protein A、Protein A/G、CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠，并向磁珠中加入洗脱缓冲液，以解除磁珠对目标蛋白的结合，使目标蛋白可用于下游分析，如 免疫印迹或质谱分析（图 2）。
DynaGreen CaptureSelect Anti-IgG-Fc 磁珠
除了使用Protein A和Protein A/G磁珠进行靶蛋白分离外，DynaGreen技术还提供CaptureSelect Anti-IgG-Fc磁珠来靶向Fc结合进行蛋白分离和纯化。
使用DynaGreen磁珠的质谱工作流程
质谱分析是对复杂生物样品中的蛋白质进行鉴定、定量和表征分析的强大工具。标准蛋白质组学工作流程包括样品提取、蛋白质分离和消化、HPLC 分离以及使用串联质谱法对所得肽段进行分析。DynaGreen Protein A、Protein A/G 和 CaptureSelect Anti IgG-Fc磁珠已通过验证，可成功分离抗体-蛋白质复合物，用于下游质谱分析。下面是建议的质谱分析流程:
- 组织
- 细胞培养
- 血清
- 血浆
- 生物液体
- 酵母
- 组织
- 细胞培养
- 血清
- 血浆
- 生物液体
- 酵母
使用 Dynabeads 磁珠和 KingFisher 仪器进行自动化样品制备
KingFisher 仪器可自动化分离 DNA、RNA、蛋白质、外泌体、病毒和细胞。KingFisher 仪器有助于消除交叉污染，产生可重复的结果，并将您的操作时间缩短至 40 分钟。设置反应板，按下启动键，然后离开。
DynaGreen 磁珠订购信息
免疫沉淀相关内容：
文献
资源
仅供科研使用，不可用于诊断目的。
© 2023 Thermo Fisher Scientific Inc. 版权所有。除非另有说明，否则所有商标均为赛默飞世尔科技及其子公司所有。
Magne 是 Promega 公司的商标。
Sepharose 是 Cytiva 生物工艺 R&D AB 的商标。
SureBeads 是 Bio-Rad Laboratories, Inc. 的商标。
sera-Mag 是 HyClone Laboratories, LLC 的商标。
GenScript 是南京 GenScript Biotech Co. 的商标。
PureProteome 是 Millipore Corporation 的商标。
ACT 是 My Green Lab 的商标。
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