从肽中去除去垢剂

Thermo Scientific Pierce 去垢剂去除树脂采用方便的旋转柱或板形式提供，可以快速有效地从蛋白或肽样品中去除离子、非离子和/或两性离子去垢剂，以提高与下游应用的兼容性。有两种配方可供选择，它们经过优化，可从不同浓度范围的肽样品中去除去垢剂。Thermo Scientific HiPPR（高蛋白和肽回收率）产品适用于≤100 μg/mL的肽样品。>标准 Pierce 去垢剂去除树脂产品非常适合浓度为 100 μg/mL 的肽样品。

高性能—去除洗涤剂，>回收率达 90%，且无需稀释样品
多功能—可有效去除肽或蛋白样品中的多种去垢剂
优化—针对肽浓度 ≤ 或 >100 μg/mL的样品单独配制
灵活—有多种形式可供选择，包括旋转柱、96 孔旋转板和松散树脂
方便—简单的方法有助于提高 MS 肽覆盖率

为您的应用选择合适的肽去垢剂去除产品

	HiPPR 去垢剂去除旋转柱	HiPPR 去垢剂去除旋转试剂盒	HiPPR 去垢剂去除旋转板	去垢剂去除旋转柱（4 种尺寸）	去垢剂去除树脂	去垢剂去除旋转板

样本量范围	100 µL	25– 200 µL	100 µL	10– 25 µL 25– 100 µL 150– 500 µL 500– 1,000 µL	10– 2,500 µL	20– 100 μL
建议的肽样品浓度范围	1– 100 µg/mL	1–100 µg/mL	1–100 µg/mL	>100 µg	>100 µg	>100 µg
形式	预填充旋转柱	5 mL 树脂 + 0.8 mL 空旋转柱	96 孔预填充旋转板	预填充旋转柱	10 mL 树脂	96 孔预填充旋转板
树脂床体积	0.1 mL	0.025–0.2 mL	0.1 mL	0.125 mL 0.5 mL 2 mL 4 mL	0.125 mL– 10 mL	0.55 mL
货号	88306	88305	88307	87777	87780	88304

标准去垢剂去除树脂结果
HiPPR 结果

表 1. 使用标准 Thermo Scientific Pierce 去垢剂去除旋转柱 (0.5 mL) 得到的结果。

去垢剂去除效率和蛋白回收率。BSA 样品 (25–200 µL) + 0.15 M NaCl、0.05% 叠氮化钠中的去垢剂与等体积的去垢剂去除树脂混合（对于 CHAPS 去除，为 2 倍体积）。

去垢剂	样品量 (µL)	蛋白含量 (µg)	去垢剂去除率 (%)	蛋白回收率 (%)
SDS (1%)	25	0.375	>99	98
	50	0.75	>99	97
	100	1.5	>99	100
	200	3.0	>99	100
Triton X-100 (1%)	25	0.375	>95	82
	50	0.75	>95	86
	100	1.5	>95	86
	200	3.0	>95	93
NP-40 (0.75%)	25	0.375	95	90
	50	0.75	96	94
	100	1.5	97	91
	200	3.0	97	97
CHAPS (1%)	25	0.375	95	64
	50	0.75	97	70
	100	1.5	98	78
	200	3.0	98	75

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图1. 使用标准 Pierce 去垢剂去除旋转柱 (0.5 mL) 得到的结果。含有去垢剂的胰蛋白酶消化物 (0.1 mL, 100 μg) 分别经过 0.5 mL Pierce 去垢剂去除树脂处理，并进行 LC-MS/MS 分析。顶行：基峰 LC-MS 色谱图。底行：积分质谱。Brij-35 去垢剂、辛基葡萄糖苷、辛基硫代葡萄糖苷和 SDS 也产生了类似的结果（未显示数据）。

Results using Detergent Removal Spin Columns

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图 2. 使用 Pierce 去垢剂去除旋转柱 (0.5 mL) 得到的结果。将含有 1% SDS 的 HeLa 细胞裂解物 (0.1 mL, 100 μg) 的胰蛋白酶消化物通过 0.5 mL Pierce 去垢剂去除树脂进行处理，然后进行 LC-MS/MS 分析。处理过的样品中所含的已鉴定肽的数量与不含 SDS 的消化物中所含的已鉴定肽的数量相似。含有 SDS 的样品中肽鉴定结果大幅降低。有效的去垢剂去除可以实现更好的肽鉴定。

表 2. 使用 Thermo Scientific HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。

每个柱和板孔含有约 550 μL 去垢剂树脂浆料和 0.1 mL 样品。

流程形式	去垢剂	去垢剂浓度 (%)	去垢剂去除率 (%)	BSA 回收率 (%)
0.5 mL 旋转柱	脱氧胆酸钠	5	99	100
	辛基葡萄糖苷	5	99	90
	辛基硫代葡萄糖苷	5	99	95
	月桂酰基麦芽糖苷	1	98	99
	Triton X-114	2	95	100
	Brij-35	1	99	97
	吐温 20	0.25	99	87
96 孔旋转板	SDS	5	99	89
	Triton X-100	4	99	100
	NP-40	1	95	100
	CHAPS	5	99	100

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图 3.使用 HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。不使用去垢剂，在 0.5% Triton X-100 存在下或在酶消化后加入 0.5% SDS 来制备 BSA (100 μg/mL) 胰蛋白酶消化物。使用 HiPPR 去垢剂去除树脂处理含有去垢剂的样品 (0.1 mL)，并通过 LC-MS/MS 与未处理或不含去垢剂的样品进行比较。结果表明，去垢剂去除是有效的，并且产生的结果与不含去垢剂的样品的观察结果类似。

Results using HiPPR Detergent Removal Resin

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图 4. 使用 HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。在有和没有去垢剂的情况下消化 BSA（25 和 100 μg/mL），然后对样品进行 LC-MS/MS 分析。有效的去垢剂去除可提高肽识别率并获得较高的 MASCOT™ 分数。

标准去垢剂去除树脂结果

表 1. 使用标准 Thermo Scientific Pierce 去垢剂去除旋转柱 (0.5 mL) 得到的结果。

去垢剂	样品量 (µL)	蛋白含量 (µg)	去垢剂去除率 (%)	蛋白回收率 (%)
SDS (1%)	25	0.375	>99	98
	50	0.75	>99	97
	100	1.5	>99	100
	200	3.0	>99	100
Triton X-100 (1%)	25	0.375	>95	82
	50	0.75	>95	86
	100	1.5	>95	86
	200	3.0	>95	93
NP-40 (0.75%)	25	0.375	95	90
	50	0.75	96	94
	100	1.5	97	91
	200	3.0	97	97
CHAPS (1%)	25	0.375	95	64
	50	0.75	97	70
	100	1.5	98	78
	200	3.0	98	75

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HiPPR 结果

表 2. 使用 Thermo Scientific HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。

每个柱和板孔含有约 550 μL 去垢剂树脂浆料和 0.1 mL 样品。

流程形式	去垢剂	去垢剂浓度 (%)	去垢剂去除率 (%)	BSA 回收率 (%)
0.5 mL 旋转柱	脱氧胆酸钠	5	99	100
	辛基葡萄糖苷	5	99	90
	辛基硫代葡萄糖苷	5	99	95
	月桂酰基麦芽糖苷	1	98	99
	Triton X-114	2	95	100
	Brij-35	1	99	97
	吐温 20	0.25	99	87
96 孔旋转板	SDS	5	99	89
	Triton X-100	4	99	100
	NP-40	1	95	100
	CHAPS	5	99	100

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为您的应用选择合适的肽去垢剂去除产品

表 1. 使用标准 Thermo Scientific Pierce 去垢剂去除旋转柱 (0.5 mL) 得到的结果。

表 2. 使用 Thermo Scientific HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。

表 1. 使用标准 Thermo Scientific Pierce 去垢剂去除旋转柱 (0.5 mL) 得到的结果。

表 2. 使用 Thermo Scientific HiPPR 去垢剂去除树脂得到的结果。

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