Kit containing complete set of TMT 10-plex Isobaric Label Reagents

串联质量标签 (TMT) 是可靠且高效的系统,可对多达 35 份样品 (来自细胞、组织或生物液体) 进行多通路相对蛋白定量测定。标记试剂套件中的所有质量标记试剂均具有相同的标称质量 (即均为同量异序) 和化学结构,由反应性基团、间臂 (质量平衡基团) 和质量报告基团组成。TMT 标记试剂的同量异序特性可使用串联质谱 (MS) 对不同样品中的蛋白进行并行鉴定和定量。

TMT 与 TMTpro 标记试剂的快速比较见 表 1

查阅 TMT 选择指南

表 1.TMT 和 TMTpro 的试剂特点比较

特点TMTTMTpro
物种反应性胺反应性
半胱氨酸反应性
羰基反应性
胺反应性
多通路测定2-plex 至 11-plex16-Plex 至 35-plex
Isotopes(同位素)15N 和 13C15N、 13C 以及 2H
化学结构
  • 肽反应性标记基团
  • 质量平衡接头
  • 二甲基哌啶质量报告基团
  • 肽反应性标记基团
  • 质量平衡接头更长
  • 异丁基脯氨酸质量报告基团
报告离子质量126–131C126–135CD
应用
  • 样品多路技术
  • 相对蛋白/肽定量

 


TMT 试剂选择指南

TMTpro 标记试剂具有更高的多通路测定能力,可用于对 16 至 35 份生物样品进行并行蛋白质谱分析。

下面列出的 TMTpro 标记试剂针对 32、34 和 35 份样品多通路测定进行了配置,从而具有相应特异性。

利用高分离度质谱仪器 (Orbitrap 系列) ,所有 TMTpro 标记试剂均可实现 16 至 35 份样品多通路测定。

了解有关 TMTpro 试剂的更多信息

多通路测定能力配置产品说明产品规格单位规格货号
32-plex匹配套件TMTpro 32plex 标记试剂匹配套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A40000839
组合套件TMTpro 16plex 氘代标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A40000817
TMTpro 16plex 标记试剂套件1 x 5 mg(每个标签)A44520
34-plex将匹配套件与独立标记组合使用TMTpro 32plex 标记试剂匹配套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A40000839
TMTpro-134C 和 TMTpro-135CD 标记试剂1 x 5 mg(每个标签)A40000853
带独立标签的组合套件TMTpro 16plex 标签试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A44520
TMTpro 16plex 氘代标记试剂套件1 x 5 mg(每个标签)A40000817
TMTpro-134C 和 TMTpro-135CD 标记试剂1 x 5 mg(每个标签)A40000853
35-plex带独立标签的组合套件TMTpro 18plex 标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A52045
TMTpro 16plex 氘代标记试剂套件1 x 5 mg(每个标签)A40000817
TMTpro-135CD 标记试剂1 x 5 mg(每个标签)A40000818

注释:上表中列出的所有产品均具有胺反应性化学成分,可标记所有蛋白和肽。

TMTpro 标记试剂具有更高的多通路测定能力,可用于对 16 至 35 份生物样品进行并行蛋白质谱分析。

下面列出的 TMTpro 标记试剂针对 16 和 18 份样品多通路测定进行了配置,从而具有相应特异性。

利用高分离度质谱仪器 (Orbitrap 系列) ,所有 TMTpro 标记试剂均可实现 16 至 35 份样品多通路测定。

了解有关 TMTpro 试剂的更多信息

多通路测定能力配置产品说明产品规格单位规格货号
16-plex套件TMTpro 16-plex 标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A44520
1 x 0.5 mg(每个标签)A44521
6 x 0.5 mg(每个标签)A44522
套件TMTpro 16plex 标记试剂(在稳定溶液、96 孔板中)液体,96 孔板6 x 50 µg(每个标签)A58334.
18-plex套件TMTpro 18-plex 标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A52045
6 x 0.5 mg(每个标签)A52047
套件TMTpro 18plex 标记试剂(在稳定溶液、96 孔板中)液体,96 孔板4 x 50 µg(每个标签)A58335
带独立标签的试剂套件TMTpro 16-plex 标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A44520
TMTpro-134C 和 TMTpro-135N 标记试剂1 x 5 mg(每个标签)A52046
带独立标签的试剂套件TMTpro 16-plex 标记试剂套件冻干6 x 0.5 mg(每个标签)A44522
TMTpro-134C 和 TMTpro-135N 标记试剂6 x 0.5 mg(每个标签)A52048

注释:上表中列出的所有产品均具有胺反应性化学成分,可标记所有蛋白和肽。

TMT 标记试剂具有更高的多通路测定能力,可用于对 2 至 11 份生物样品进行并行蛋白质谱分析。

下面列出的 TMT 标记试剂针对 10 和 11 重样品测定进行了配置,从而具有相应特异性。

了解有关 TMT 试剂的更多信息

多通路测定能力仪器分离度兼容的仪器产品说明产品规格单位规格货号
10 重测定高分离度OrbitrapTMT10plex 同量异序质量标签试剂盒冻干30 次反应90113
TMT10plex 同量异序标记试剂套件冻干  1 x 0.8 mg(每个标签)90110
3 x 0.8 mg(每个标签)90111
1 x 5 mg(每个标签)90406
8 x 0.2 mg(每个标签)90309
采用 TMT 10plex 标记试剂(在稳定溶液、96 孔板中)液体,96 孔板8 x 40 µg(每个标签)A58332
11-plex高分离度OrbitrapTMT10plex 同位素标记试剂套件加 TMT11-131C 标记试剂冻干  1 x 5 mg(每个标签)A34808
3 x 0.8 mg(每个标签)A37725
TMT 11plex 标记试剂(溶液稳定的 96 孔板)液体,96 孔板8 x 40 µg(每个标签)A58333
TMT11-131C 标记试剂冻干1 x 5 mgA34807
3 x 0.8 mgA37724

注释:上表中列出的所有产品均具有胺反应性化学成分,可标记所有蛋白和肽。

TMT 标记试剂具有更高的多通路测定能力,可用于对 2 至 11 份生物样品进行并行蛋白质谱分析。

下面列出的 TMT 标记试剂针对 2 和 6 份样品多通路测定进行了配置,从而具有相应特异性。

该标签上的 2 和 6 重测定标记试剂兼容标称和高分离度仪器。

了解有关 TMT 试剂的更多信息

多通路测定能力反应性化学基团产品说明单位规格货号
2-plex胺反应性TMTduplex 同量异序质量标签试剂盒15 反应90063
TMTduplex 同量异序标记试剂套件5 x 0.8 mg90065
TMTduplex 同位素标记试剂套件5 x 0.8 mg90060
6-plex胺反应性TMTsixplex 同量异序标记试剂盒 35 反应90064
联系我们90064B
TMTsixplex 同量异序标记试剂套件1 x 0.8 mg(每个标签)90061
2 x 0.8 mg(每个标签)90062
5 x 0.8 mg(每个标签)90066
2 x 5 mg(每个标签)90068
半胱氨酸反应性iodoTMTsixplex 同量异序质量标签试剂盒30 次反应90103
iodoTMTsixplex 同量异序标记试剂套件1 x 0.2 mg(每个标签)90101
5 x 0.2 mg(每个标签)90102
羰基反应性aminoxyTMTsixplex 标记试剂套件1 x 0.2 mg(每个标签)90401
5 x 0.2 mg(每个标签)90402

其他 TMT 和 TMTpro 试剂

了解更多有关 Super Heavy TMT 试剂的信息

应用反应性化学基团TMT 类型产品*产品规格单位规格货号
LC-MS 方法开发胺反应性*TMTproTMTpro Zero 标记试剂冻干1 x 5 mgA44518
冻干6 x 0.5 mgA44519
专为靶向多通路测定而设计Super Heavy TMTpro 标记试剂冻干2 mgA52040
LC-MS 方法开发TMTTMT Zero 标记试剂冻干5 x 0.8 mg90067
专为靶向多通路测定而设计Super Heavy TMT 标记试剂冻干2 mgA43073
LC-MS 方法开发半胱氨酸反应性 **iodo TMTzero 标记试剂冻干5 x 0.2 mg90100

* 胺反应性化学基团可标记所有蛋白质和肽。
** 半胱氨酸反应性化学基团标记含还原型半胱氨酸 (Cys) 残基的肽。

AccelerOme TMT 标记试剂盒可通过蛋白质质谱法进行多通路相对定量。这些试剂盒可以组合包供货,包含一个样品制备模块、一个 TMT 模块以及一种肽保留时间校准混合物。

利用高分离度质谱仪器 (Orbitrap 系列) ,所有 TMTpro 标记试剂均可实现 16 至 35 份样品多通路测定功能。

了解有关 AccelerOme 试剂的更多信息

注释:上表中列出的所有产品均具有胺反应性化学成分,可标记所有蛋白和肽。

TMTpro 标记试剂具有更高的多通路测定能力,可用于对 16 至 35 份生物样品进行并行蛋白质谱分析。

下面列出的 TMTpro 标记试剂针对 32、34 和 35 份样品多通路测定进行了配置,从而具有相应特异性。

利用高分离度质谱仪器 (Orbitrap 系列) ,所有 TMTpro 标记试剂均可实现 16 至 35 份样品多通路测定。

了解有关 TMTpro 试剂的更多信息

多通路测定能力配置产品说明产品规格单位规格货号
32-plex匹配套件TMTpro 32plex 标记试剂匹配套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A40000839
组合套件TMTpro 16plex 氘代标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A40000817
TMTpro 16plex 标记试剂套件1 x 5 mg(每个标签)A44520
34-plex将匹配套件与独立标记组合使用TMTpro 32plex 标记试剂匹配套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A40000839
TMTpro-134C 和 TMTpro-135CD 标记试剂1 x 5 mg(每个标签)A40000853
带独立标签的组合套件TMTpro 16plex 标签试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A44520
TMTpro 16plex 氘代标记试剂套件1 x 5 mg(每个标签)A40000817
TMTpro-134C 和 TMTpro-135CD 标记试剂1 x 5 mg(每个标签)A40000853
35-plex带独立标签的组合套件TMTpro 18plex 标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A52045
TMTpro 16plex 氘代标记试剂套件1 x 5 mg(每个标签)A40000817
TMTpro-135CD 标记试剂1 x 5 mg(每个标签)A40000818

注释:上表中列出的所有产品均具有胺反应性化学成分,可标记所有蛋白和肽。

TMTpro 标记试剂具有更高的多通路测定能力,可用于对 16 至 35 份生物样品进行并行蛋白质谱分析。

下面列出的 TMTpro 标记试剂针对 16 和 18 份样品多通路测定进行了配置,从而具有相应特异性。

利用高分离度质谱仪器 (Orbitrap 系列) ,所有 TMTpro 标记试剂均可实现 16 至 35 份样品多通路测定。

了解有关 TMTpro 试剂的更多信息

多通路测定能力配置产品说明产品规格单位规格货号
16-plex套件TMTpro 16-plex 标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A44520
1 x 0.5 mg(每个标签)A44521
6 x 0.5 mg(每个标签)A44522
套件TMTpro 16plex 标记试剂(在稳定溶液、96 孔板中)液体,96 孔板6 x 50 µg(每个标签)A58334.
18-plex套件TMTpro 18-plex 标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A52045
6 x 0.5 mg(每个标签)A52047
套件TMTpro 18plex 标记试剂(在稳定溶液、96 孔板中)液体,96 孔板4 x 50 µg(每个标签)A58335
带独立标签的试剂套件TMTpro 16-plex 标记试剂套件冻干1 x 5 mg(每个标签)A44520
TMTpro-134C 和 TMTpro-135N 标记试剂1 x 5 mg(每个标签)A52046
带独立标签的试剂套件TMTpro 16-plex 标记试剂套件冻干6 x 0.5 mg(每个标签)A44522
TMTpro-134C 和 TMTpro-135N 标记试剂6 x 0.5 mg(每个标签)A52048

注释:上表中列出的所有产品均具有胺反应性化学成分,可标记所有蛋白和肽。

TMT 标记试剂具有更高的多通路测定能力,可用于对 2 至 11 份生物样品进行并行蛋白质谱分析。

下面列出的 TMT 标记试剂针对 10 和 11 重样品测定进行了配置,从而具有相应特异性。

了解有关 TMT 试剂的更多信息

多通路测定能力仪器分离度兼容的仪器产品说明产品规格单位规格货号
10 重测定高分离度OrbitrapTMT10plex 同量异序质量标签试剂盒冻干30 次反应90113
TMT10plex 同量异序标记试剂套件冻干  1 x 0.8 mg(每个标签)90110
3 x 0.8 mg(每个标签)90111
1 x 5 mg(每个标签)90406
8 x 0.2 mg(每个标签)90309
采用 TMT 10plex 标记试剂(在稳定溶液、96 孔板中)液体,96 孔板8 x 40 µg(每个标签)A58332
11-plex高分离度OrbitrapTMT10plex 同位素标记试剂套件加 TMT11-131C 标记试剂冻干  1 x 5 mg(每个标签)A34808
3 x 0.8 mg(每个标签)A37725
TMT 11plex 标记试剂(溶液稳定的 96 孔板)液体,96 孔板8 x 40 µg(每个标签)A58333
TMT11-131C 标记试剂冻干1 x 5 mgA34807
3 x 0.8 mgA37724

注释:上表中列出的所有产品均具有胺反应性化学成分,可标记所有蛋白和肽。

TMT 标记试剂具有更高的多通路测定能力,可用于对 2 至 11 份生物样品进行并行蛋白质谱分析。

下面列出的 TMT 标记试剂针对 2 和 6 份样品多通路测定进行了配置,从而具有相应特异性。

该标签上的 2 和 6 重测定标记试剂兼容标称和高分离度仪器。

了解有关 TMT 试剂的更多信息

多通路测定能力反应性化学基团产品说明单位规格货号
2-plex胺反应性TMTduplex 同量异序质量标签试剂盒15 反应90063
TMTduplex 同量异序标记试剂套件5 x 0.8 mg90065
TMTduplex 同位素标记试剂套件5 x 0.8 mg90060
6-plex胺反应性TMTsixplex 同量异序标记试剂盒 35 反应90064
联系我们90064B
TMTsixplex 同量异序标记试剂套件1 x 0.8 mg(每个标签)90061
2 x 0.8 mg(每个标签)90062
5 x 0.8 mg(每个标签)90066
2 x 5 mg(每个标签)90068
半胱氨酸反应性iodoTMTsixplex 同量异序质量标签试剂盒30 次反应90103
iodoTMTsixplex 同量异序标记试剂套件1 x 0.2 mg(每个标签)90101
5 x 0.2 mg(每个标签)90102
羰基反应性aminoxyTMTsixplex 标记试剂套件1 x 0.2 mg(每个标签)90401
5 x 0.2 mg(每个标签)90402

其他 TMT 和 TMTpro 试剂

了解更多有关 Super Heavy TMT 试剂的信息

应用反应性化学基团TMT 类型产品*产品规格单位规格货号
LC-MS 方法开发胺反应性*TMTproTMTpro Zero 标记试剂冻干1 x 5 mgA44518
冻干6 x 0.5 mgA44519
专为靶向多通路测定而设计Super Heavy TMTpro 标记试剂冻干2 mgA52040
LC-MS 方法开发TMTTMT Zero 标记试剂冻干5 x 0.8 mg90067
专为靶向多通路测定而设计Super Heavy TMT 标记试剂冻干2 mgA43073
LC-MS 方法开发半胱氨酸反应性 **iodo TMTzero 标记试剂冻干5 x 0.2 mg90100

* 胺反应性化学基团可标记所有蛋白质和肽。
** 半胱氨酸反应性化学基团标记含还原型半胱氨酸 (Cys) 残基的肽。

AccelerOme TMT 标记试剂盒可通过蛋白质质谱法进行多通路相对定量。这些试剂盒可以组合包供货,包含一个样品制备模块、一个 TMT 模块以及一种肽保留时间校准混合物。

利用高分离度质谱仪器 (Orbitrap 系列) ,所有 TMTpro 标记试剂均可实现 16 至 35 份样品多通路测定功能。

了解有关 AccelerOme 试剂的更多信息

注释:上表中列出的所有产品均具有胺反应性化学成分,可标记所有蛋白和肽。

TMTpro 试剂概述

TMTpro 16-plex 和 35-plex 标记试剂是新一代 TMT 试剂 (TMT 标签) ,可提高多通路测定能力和样品处理通量[1]。对来源于细胞、组织或生物液体的多达 35 份样品进行并行蛋白质谱分析,准确度和精密度均可达到。

胺反应性 TMTpro 试剂可用于标记胰蛋白酶肽,无论其蛋白序列或酶特异性如何。同量异序 TMTpro 标记试剂在设计上与原始 TMT 标记试剂相似,只是它们具有更长的间隔区和异丁基脯氨酸质量报告基团区 (图 1)。在 MS/MS 片段化之后,每个 TMTpro 标签在高分离度 MS/MS 质谱的低质量区域生成一独特报告基团质量(126-135 Da),用于蛋白的相对定量测定。

TMTpro 和原始 TMT 标记试剂的工作流程相同 (图 2)。 其他质谱试剂,如标准品、缓冲液、抗体和样品制备试剂盒,均可单独购买 (表 2)。

TMTpro 零标记试剂 (作为“轻”标签) 用于方法开发和标记优化,然后再对标记样品进行多通路分析。 它是昂贵的同位素标记化合物的合适替代品。TMTpro 零标记试剂可检测和优化样品制备、标记、分馏和裂解以用于肽鉴定和报告基团检测。

Functional regions of TMTPro reagents’ chemical structure

图1.TMTpro 标记试剂的结构设计。TMTpro 试剂结构的功能区域包括通过更高能量碰撞解离 (HCD) 的 MS/MS 裂解位点。

表2.其他 MS 试剂。

工作流程步骤产品单位规格货号
TMT 标准Pierce TMT11plex 酵母菌酶切标准品20 µgA40938
5 x 20 µgA40939
TMT 标记1M 碳酸氢三乙基铵 (TEAB),用于 TMT 实验50 mL90114
TMT 淬火用于 TMT 实验的 50% 羟胺5 mL90115
富集 TMT 标记肽TMT 单克隆抗体 (25D5)100 µg90075
富集 TMT 标记肽固定抗 TMT 抗体树脂6 mL90076
富集 TMT 标记肽TMT 洗脱缓冲液20 mL90104
TMT 兼容肽样品制备EasyPep MS 样品制备试剂盒8 反应A45734
20次反应A40006
96 次反应A45733
TMT 兼容肽样品制备EasyPep 裂解缓冲液100 mLA45735


TMT 试剂概述

TMT 标记试剂 (TMT 标记) 可使用蛋白质谱法对生物样品进行多通路(2-plex 至 11-plex)相对定量测定。TMT 试剂的化学结构由肽反应性标记基团、质量报告基团和间隔臂 (质量正化酶) 组成 (图 3)。基于反应化学基团, TMT 试剂可分为三类—胺反应性、半胱氨酸反应性和羰基反应性。

  • 胺反应性试剂在上述 TMTpro 部分中有说明。结构如 图 3 (a)所示。
  • iodoTMT 试剂与肽和蛋白中的还原型半胱氨酸 (Cys) 发生特异性反应,并不可逆地标记游离巯基 (图 3 (B))。
  • aminoxyTMT 试剂经过优化,可高效地标记和回收聚糖和其他碳酰基反应蛋白,并提供更高的标记产品稳定性(图 3 (C))。

TMT 10-plex 和 11-plex 标记试剂与 TMTzero、TMTduplex 和 TMTsixplex 试剂结构完全相同,只是质量报告基团上含有 13C 和 15N 同位素的数量和组合不同。

Functional regions of the TMT reagents’ chemical structure

图3.TMT 试剂的结构设计。TMT 试剂结构的功能区域包括通过更高能量碰撞解离 (HCD) 和电子转移解离 (ETD) 和碰撞诱导解离 (CID) 进产生的 MS/MS 裂解位点。胺反应性、半胱氨酸反应性和羰基反应性 TMT 试剂,如 (A)(B)(C)所示。


液体、96 孔规格概述

冻干形式的 TMT 标记试剂对水分具有极高的反应性,必须非常小心处理以确保功能正常。已开发出一子套件的 TMT 10-plex 和 11-plex 以及 TMTpro 16-plex 和 18-plex 标记试剂,以液体形式稳定,并在 96 孔板中预等分,从而简化处理。

亮点包括:

  • 支持更高通量,借助条形码实现自动化操作
  • 经济实用,反应板可灵活分部使用;具有多次冻融稳定性
  • 简化处理;无需将冻干试剂重新格式化到多孔板中
  • 与冻干 TMT 和 TMTpro 标记试剂的性能相当
  • 1-10 μg 酶切蛋白的标记能力,所需起始材料更少
TMTpro 16plex Label Reagents in stablized solution, 96-well plate

96 孔板 TMT 标记试剂

Bottom view of TMT 96-well plate
(A) 液体稳定的 TMT/TMTpro
Cut and peel foil for partial TMT plate use
(B) 切割并剥离箔封
Punctured foil seal
(c) 箔封可刺穿

图 4.96 孔板 TMT 标记试剂。 灵活的 96 孔 TMT 标记试剂规格,溶液稳定,采用条形码,有自动化使用可选择,箔封易于剥离或穿刺。对于反应板分部使用,可以将 TMT 和 TMTpro 标记试剂解冻并多次重新冷冻,同时保持高性能。 (A) 在 96 孔板中预等分 TMT 和 TMTpro 稳定溶液。(B) 箔封可剥离和切割,使反应板实现分部使用。(C) 可轻松穿刺箔封,从而使反应板实现分部使用。

Super Heavy TMT 试剂

Super Heavy TMT (shTMT) 和 shTMTpro 标记试剂是非同量异序胺反应性 TMT 变体,是基于前体蛋白定量的合适替代品 [3, 4]。这些 TMT 衍生物含有分散在报告基团和间隔区域的重同位素 (+11 质量单位) 数量的两倍(图 4)。它们用作触发肽选择的质量偏移。Super Heavy TMT (shTMT) 和 shTMTpro 标记试剂的工作流程相同 (图 5)。这种 shTMT 标记试剂与 TMT 或 TMTpro 标记样品结合使用,超重标记的合成肽发生的质量偏移可作为多通路测定样品中靶标肽选择的触发因素。这种触发选择可减少干扰/共分离,从而实现更可靠的定量测定。

Structural design of Super heavy TMTpro label reagent

图 5.Super Heavy TMTpro (shTMTpro) 标记试剂的化学结构

Schematic workflow of Super heavy TMTpro reagents

图 6.Super Heavy TMTpro 工作流程。

AccelerOme 试剂

AccelerOme 试剂是下一代串联质量标签 (TMT) 的最新补充,可在 AccelerOme 自动化样品制备平台上支持自动化样品制备和 TMT 标记。这个平台集成了仪器和试剂,可自动处理多达 36 份样品,以便对蛋白进行还原、烷基化和酶切,然后进行 TMT 或 TMTpro 标记和纯化。TMT 或 TMTpro 标记的样品适于使用高分离度 Thermo Scientific Orbitrap LC-MS/MS 仪器进行分析(图 6)。

Schematic representation of AccelerOme automated sample preparation system

图 7.AccelerOme 自动化样品制备系统的支持试剂盒和工作流程。

视频与网络讲座

TMT10plex 试剂在起作用

了解如何用串联质谱标记制备和标记肽样品,以用于定量蛋白质组学分析。

相关资源
accelerome-brochure-400x350

AccelerOme 自动化样品制备平台手册

 下载

proteome-discoverer-software-application-note-400x350-2

Proteome Discoverer 2.3 软件应用说明

 下载

参考文献
Stylesheet for Classic Wide Template adjustments

仅供科研使用,不可用于诊断目的。