FITC（异硫氰酸荧光素）是一种广泛用作抗体或其他探针标记物的荧光染料。FITC 吸收紫外光或蓝光，激发分子，然后发出可见的黄绿色光。当激发光消失时，发射光即停止。FITC 具有高荧光，激发和发射峰值波长约为 495 nm 和 525 nm。FITC 与蛋白的偶联相对简单，并且通常不会改变标记蛋白的生物活性。Invitrogen 抗 FITC 抗体能可靠检测 FITC，并且如果一种现有抗体仅作为 FITC 偶联物提供，其可在双重标记时使用。抗 FITC 抗体也可用于验证 FITC 偶联是否有效。我们的 FITC 抗体可选择单克隆、多克隆或重组，并可提供偶联或未偶联选项。

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应用

Invitrogen 抗 FITC 抗体旨在可靠检测各种应用中的 FITC。

Flow cytometry using anti-FITC antibody for quenching of fluorescence

使用抗 FITC 抗体进行流式细胞分析。固定和透化的 A549 细胞用小鼠抗微管蛋白抗体 (1 µg/mL) 标记，然后使用 FITC 偶联的山羊抗小鼠 IgG 二抗（右峰，绿色）进行检测。为了确认特异性，使用小鼠同型对照标记细胞，并使用 FITC 山羊抗小鼠 IgG（中峰，粉色）进行染色。在 1:100 稀释的 FITC 重组多克隆抗体（货号：710083）预孵育后，荧光的淬灭显示为中间峰值（红色）。未染色的对照细胞如图所示（左峰，紫色）。使用 Attune NxT 流式细胞仪采集并分析每个样品的 10,000 个代表性细胞。

异硫氰酸荧光素 (FITC) 抗体检测的 蛋白免疫印迹分析。分析通过将不同量的 FITC-BSA 偶联物上样到 4–20% Tris 甘氨酸聚丙烯酰胺凝胶的每个孔中完成。将蛋白转印到 PVDF 膜上并采用 5% 的脱脂牛奶在室温下封闭至少 1 小时。使用 FITC 单克隆抗体 (#8)（货号：MA5-14709）以 1 µg/mL 的稀释浓度，在 5% 的脱脂牛奶中，于 4°C 下在摇摆平台上孵育过夜，检测到约 72 kD 的 FITC-BSA。随后使用山羊抗小鼠 IgG (H+L) 二抗，HRP（货号：31430），以 1:50000 的稀释浓度孵育至少 1 小时。使用 SuperSignal West Dura 持久性底物（货号：34076）进行化学发光检测。

Western blot analysis of FITC antibody detection

资源