His 标签是由六个到九个组氨酸残基融合到重组蛋白的羧基端或氨基端组成的。与其他常见的抗原决定簇标签相比，His 标签的较小，因此不太可能阻碍靶蛋白的结构或功能，并且更适合在变性条件下使用。组氨酸残基链可以结合多种类型的固定的金属离子，包括镍、钴和铜。 在特定缓冲液条件下，与金属离子的结合可以让 His 标签蛋白的纯化和检测变得简单。His 标签抗体为检测和纯化标记靶蛋白提供了一种可靠的方法，并且无需使用蛋白特异性抗体或探针。我们的 His 标签抗体还提供了 HRP、生物素或荧光基团偶联的选项，以满足您的所有研究需求。Invitrogen His 标签抗体能够可靠地检测重组 His 标签蛋白，并且经过验证可用于各种应用。

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应用

Invitrogen His 标签抗体经过验证，可用于免疫印迹、ELISA、流式细胞术、免疫荧光、免疫组织化学、免疫细胞化学和免疫沉淀等应用。

在 HEK-293 细胞上完成的组氨酸标签 (6x-His) 的免疫荧光分析。左：未转染的对照品；右：HEK293 细胞中 His 标签融合蛋白的抗 His 抗体染色（红色）。细胞使用 6x-His 标签单克隆抗体 (HIS.H8)，HRP（货号 MA1-21315) 进行标记。两者均用 DAPI（蓝色）复染。 使用兔抗小鼠 IgG (H+L) 交叉吸附二抗，Alexa Fluor 488（货号：A11059），稀释比为 1:400，在室温下孵育 30 分钟。使用 Attune 声波聚焦流式细胞仪采集并分析每个样品的 10,000 个代表性细胞。紫色直方图表示未染色的对照细胞绿色直方图表示无一抗的对照细胞。

对瞬时过表达 His-IGFBP6 的 HEK-293 细胞进行组氨酸标签 (6x-His) 的流式细胞术分析。将细胞用 70％ 乙醇固定 10 分钟，用 0.25％ Triton™ X-100 透化 20 分钟，并在室温下用 5％ BSA 封闭 1 小时。细胞使用 6x-His 标签单克隆抗体 (4A12E4)（货号 372900，红色直方图）或用小鼠同种型对照品（粉色直方图）在 2.5% BSA 中标记，稀释比为 1:400。在室温下孵育 3 小时后，使用 Alexa Fluor 488 标记细胞。

Flow cytometry detection of Histidine tag using 6x-his mouse monoclonal antibody
Western blot analysis of 6x-His Tag using 6x-His Epitope Tag monoclonal antibody

通过免疫印迹分析 6x-His 抗原决定簇标签，将含有多种表位标签蛋白的大肠杆菌裂解液以不同量加载到 4%-20% Tris-HCl 聚丙烯酰胺凝胶的每个孔中。将蛋白转印到 PVDF 膜上并采用 5% BSA/TBST 封闭至少 1 小时。膜用 6x-His 标签单克隆抗体 (HIS.H8)，HRP（货号：MA1-21315-HRP）标记，在 4°C 摇床上过夜孵育，稀释比为 1:1000，然后用 TBS-0.1% Tween™ 20 洗涤。使用 SuperSignal West Pico PLUS 化学发光底物（货 号 34580）进行化学发光检测。

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