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抗-DYKDDDDK 标签抗体 (结合至 FLAG® 序列)
FLAG 标签 (肽序列 DYKDDDDK) 是一种亲水性短蛋白标签，通常用于与蛋白质拉下试验中的抗体结合使用，以研究蛋白间相互作用。可以将 FLAG 标签插入靶标蛋白的 N 端（N 端之前有蛋氨酸残基)、C 端或内部位置。由于其亲水性，标记标签通常存在于融合蛋白的表面，这使其更可以作为与抗体结合的抗原决定簇。此外，标记标签亲水性高且尺寸小，往往对蛋白表达、蛋白水解成熟、抗原性和功能的干扰较小。FLAG 标签也可通过肠激酶 (EK) 轻松去除。我们提供对 FLAG 标签具有特异性的优质抗体，可满足多种研究需求。我们的 FLAG 标记抗体具有荧光和酶偶联版本，可增加您的便利性。
此处列出的所有抗体均可识别与 Sigma-Aldrich ANTI-FLAG® M2 抗体类似的抗原决定簇。FLAG 是 Merck KGaA 的注册商标（德国 Darmstadt)，ANTI-FLAG 是 Sigma-Aldrich Co. LLC 的商标。
应用
对于免疫荧光分析 DYKDDDDK — BNIP3 转染的 HEK293 细胞经过固定和透化，以便监测 DYKDDDDK 标签蛋白，使用 DYKDDDDK 标签重组多克隆抗体 (货No. 740001，
1 µg) ，并使用 山羊抗兔 IgG (H+L) Superclonal 重组二抗 Alexa Fluor 488 (货号 A27034, 1:2000)。图 a) 显示了代表性细胞，经染色后用于检测和定位 DYKDDDDK-标签 蛋白 (绿色) ，图 b) 是针对细胞核的染色，使用 SlowFade Gold 抗淬灭封片剂和 DAPI (货No. S36938)。图 c) 代表细胞骨架纤维状肌动蛋白染色，使用了 罗丹明标记的鬼笔环肽 (货号 R415, 1:300)。图 d 是图 a、b 和 c 的复合图片，明确展现了 DYKDDDDK-BNIP3 的细胞质定位。图 e) 显示没有未转染细胞的信号， 图 f) 代表无一抗的对照细胞，是用来评估背景的。
通过将各量 大肠杆菌 裂解物（每孔含有多抗原决定簇标记的蛋白）上样至 4-20% Tris-HCl 聚丙烯酰胺凝胶来对 FLAG 抗原决定簇标签进行 Western 印迹分析。将蛋白质转移到低荧光 PVDF 膜上，并用鱼血清封闭缓冲液封闭至少 1 小时。该膜的探针标记采用了 DYKDDDDK 标签单克隆抗体 (L5), Alexa Fluor 488 (货号 MA1-142-A488) ，稀释度为 1:500，在室温下在摇摆振荡平台持续 1 小时，并用 TBS-0.1% Tween-20 洗涤。使用荧光成像系统进行检测。
